陈志，张逸，路钦越，郭佳禾，梁艳，张明怡星，杨章平

茶树油对LPS诱导的奶牛乳腺炎的作用及其机制

陈志，张逸，路钦越，郭佳禾，梁艳，张明怡星，杨章平

扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州 225009

【】奶牛乳腺炎一直是奶牛养殖业和奶制品行业最大的挑战之一，制约着奶业的健康发展。有效进行奶牛乳腺炎的防治，可以为奶牛的健康、生产优质乳制品提供良好保障。探究茶树油对LPS诱导的奶牛乳腺炎作用效果，探索茶树油替代抗生素治疗奶牛乳腺炎的可行性，为茶树油治疗奶牛乳腺炎提供参考。在牛乳腺上皮细胞的培养中分别添加50、100、200、500、1 000μg·mL-1的LPS进行相关指标的检测。通过CCK-8法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡、实时荧光定量检测细胞因子表达量以及ELISA检测相关蛋白的表达量等方法检测乳腺上皮细胞的相关指标。研究构建了LPS诱导的奶牛乳腺炎模型。在200μg·mL-1LPS诱导12h的奶牛乳腺炎细胞模型中分别添加0.0002%、0.0004%、0.0006%、0.0008%、0.001%、0.002%、0.004%、0.006%、0.008%、0.01%的茶树油进行相关指标的检测。CCK-8法检测细胞增殖活性，结果显示100μg·mL-1的LPS攻毒情况下，细胞已开始出现不同程度的活性下降情况。进一步使用流式细胞术检测细胞凋亡情况，结果显示在诱导12h的情况下，100μg·mL-1的LPS并未出现大量的细胞凋亡，而200μg·mL-1的LPS诱导情况下约有46%左右的细胞出现了早期凋亡和晚期凋亡。以上结果表明：试验中，200μg·mL-1LPS诱导12h为构建奶牛乳腺炎模型的最佳条件。添加茶树油浓度为0.0004%、0.0006%、0.0008%时细胞的凋亡比例会有所下降，其中添加茶树油浓度为0.0006%的这一组保护效果最为明显，其活细胞比例71.95％，早期凋亡细胞比例22.15％，晚期凋亡细胞比例5.11％，与未添加茶树油的乳腺炎模型组活细胞相比提高了约22%。……