曾之扬，陆佳微，曹希雅，王芯悦，李大力

技术与方法

一种GLP-1过表达肠类器官构建的方法

曾之扬1，陆佳微1，曹希雅1，王芯悦2,3，李大力1

1. 华东师范大学生命科学学院，上海市调控生物学重点实验室，上海 200241 2. 安徽理工大学医学院，淮南 232000 3. 上海交通大学附属第六人民医院南院消化内科，上海 201499

胰高血糖素样肽1 (glucagon-like peptide 1, GLP-1)作为一种肠促胰岛素，主要由肠道L细胞分泌，由于其能够有效促进胰岛素的释放从而降低血糖，因此GLP-1及其类似物在2型糖尿病的治疗上具有良好的应用前景。本研究优化了慢病毒感染类器官的方法，利用该方法成功构建了GLP-1过表达的小鼠小肠类器官(organoids)。结果显示该类器官分泌的GLP-1能够有效地提高野生型及糖尿病小鼠的葡萄糖耐受能力。因此，本研究构建的GLP-1过表达类器官可以为2型糖尿病的治疗提供一种新的策略。

胰高血糖素样肽1；2型糖尿病；小肠类器官

胰岛素分泌障碍是2型糖尿病的标志。2型糖尿病治疗策略之一是基于肠道内分泌型L细胞产生的胰高血糖素样肽1 (glucagon-like peptide 1, GLP-1)的降血糖作用，GLP-1具有促进胰岛素的释放，提高胰岛β细胞增殖及存活，促进饱腹感等功能[1～3]。GLP-1在机体摄取营养物质时被释放，随后被二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase 4, DPP4)迅速降解，因此其半衰期大约只有1～2 min[4,5]。已有研究表明将人GLP-1与小鼠免疫球蛋白G重链恒定区(IgG1heavy chain constant regions)结合形成融合蛋白(GLP-1/Fc)可以有效延长其半衰期，提高生物利用率[6,7]。目前GLP-1/Fc融合蛋白已在糖尿病小鼠模型的治疗中被广泛应用。例如通过肌肉注射GLP-1/Fc过表达质粒能够促进胰岛素产生并提高小鼠的糖耐受能力[7]。……