唐湘薇，楚丹，颜赛娜，尹艳飞，卞桥，翁波，陈斌，冉茂良

研究报告

miR-191靶向基因通过激活PI3K/AKT信号通路促进猪未成熟支持细胞增殖

唐湘薇，楚丹，颜赛娜，尹艳飞，卞桥，翁波，陈斌，冉茂良

湖南农业大学动物科学技术学院，畜禽遗传改良湖南省重点实验室，长沙 410128

睾丸支持细胞数量是影响精子生成能力的主要因素之一，microRNA (miRNA)参与调控猪未成熟支持细胞的发育过程，然而，大多数被鉴定出的miRNA对支持细胞的作用及其机制尚不明确。基于本课题组前期高内涵筛选结果，本文进一步通过流式细胞术、蛋白免疫印迹和双荧光素酶报告基因等方法，研究了调控猪未成熟支持细胞增殖和凋亡的作用机理。结果表明：过表达显著促进细胞周期由G1期进入S期和G2期，细胞增殖能力显著增强，细胞凋亡率显著降低；而抑制表达则与之相反。双荧光素酶报告基因系统验证直接靶向基因3′-UTR。抑制表达基因促进细胞周期进入S期，并促进细胞增殖而抑制细胞凋亡，与过表达的作用一致。共转染试验结果显示，基因可以拮抗对细胞增殖和凋亡的调控作用。此外，过表达和抑制表达基因均可显著促进PI3K/AKT信号通路中关键蛋白PI3K和AKT的磷酸化水平，且基因同样拮抗对PI3K和AKT蛋白的调控作用。本研究结果证实靶向基因，通过激活PI3K/AKT信号通路促进猪未成熟支持细胞增殖且抑制其凋亡，为进一步解析调控猪精子生成的生物学功能提供了理论基础。

；基因；PI3K/AKT信号通路；增殖；猪睾丸支持细胞

睾丸支持细胞作为生精小管内一种体细胞，不仅通过细胞间的紧密连接形成血睾屏障，为精子细胞的生长发育提供物理支撑和稳定的微环境，还分泌多种细胞因子以保障和促进精子细胞的成熟。……