崔艳红 张轩斌 赵江 金博 李克芳 张伟杰

(1南阳市中心医院呼吸内科二病区，河南 南阳 473000;2郑州大学第一附属医院肿瘤一科)

肺癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势，对患者及社会造成严重的威胁〔1〕。微小RNA(miRNA)是一类广泛存在的内源性非编码RNA，参与细胞的增殖、分化、凋亡等重要病理生理过程〔2〕。越来越多的研究证明，miRNA与肿瘤细胞的增殖、凋亡有密切联系，全基因组表达谱系显示，miR-21在结肠癌、乳腺癌、肺癌、胃癌等肿瘤组织中高表达，且可增强淋巴瘤细胞迁移能力〔3～5〕。研究显示，下调miR-21的表达，可抑制肺癌H460细胞的生长，增加细胞的凋亡〔6〕。与正常乳腺组织相比，叉头蛋白P2抗体(FOXP2)在乳腺癌组织中的表达显著降低，可抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭〔7〕。但FOXP2在肺癌细胞中的表达及其对肺癌细胞增殖和凋亡的影响未见报道，且miR-21-5p是否靶向调控FOXP2的表达影响肺癌细胞的增殖和凋亡目前还尚未可知。故本研究通过分子生物学技术探究miR-21-5p、FOXP2在肺癌细胞中的表达及其靶向关系，为临床分子靶向治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1试剂与仪器 肺癌细胞株A549、NCl-H460、H1299、正常肺上皮细胞BEAS-2B均购自中国科学院上海细胞库；Trizol试剂盒、LipofectamineTM2000转染试剂均购自美国Invitrogen公司；胎牛血清、DMEM培养基均购自美国Gibco公司；荧光定量试剂盒购自大连TaKaRa公司；FOXP2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、GAPDH一抗均购自美国Abcam公司；B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3一抗均购自美国CST公司；荧光素酶活性试剂盒购自Promega公司。

1.2实验方法

1.2.1细胞的培养及模型的建立 肺癌细胞株A549、NCl-H460、H1299及正常肺上皮细胞BEAS-2B在含有10%胎牛血清的DMEM培养基，5%CO2、37℃条件培养箱中传代培养。……