王平 赖闻 田松明

(重庆市两江新区第一人民医院耳鼻喉科，重庆 401121)

鼻咽癌是一种起源于人鼻咽部上皮组织的恶性肿瘤，属于头颈部癌，常见于东亚和东南亚[1]；其在我国东南部地区特别是广东省高度流行，治疗方案包括顺铂或5-氟尿嘧啶为主的放化疗方案及外科干预[2]。放化疗耐受是临床治疗失败的主要原因，研究鼻咽癌的化疗耐受靶点可为其治疗提供新的方向，减轻患者痛苦，提高生存率。研究[3]表明，miR-221在骨肉瘤细胞系MG-63、SaoS-2和U2OS中明显上调，miR-221的过表达促进骨肉瘤细胞的侵袭、迁移、增殖和顺铂耐药，抑制其表达可增强骨肉瘤细胞的顺铂敏感性。miR-221-5p在人鼻咽癌微环境癌相关成纤维细胞中上调表达[4]。生物信息学分析发现，乙醛脱氢酶1家族A2成员(Aldehyde dehydrogenase 1 family member A2，ALDH1A2)的3′UTR区含有与miR-221-5p互补的序列。ALDH1A2在高级别上皮性卵巢癌组织中表达低于低级别上皮性卵巢癌组织，其过表达可抑制上皮性卵巢癌细胞株的增殖和迁移，而ALDH1A2的下调显著增加了细胞的生长和迁移[5]。ALDH1A2在人结肠癌组织中表达下调，其过表达具有抑制结肠癌细胞增殖、克隆形成及侵袭的作用[6]。ALDH1A2与miR-221-5P在鼻咽癌中的表达和作用尚不清楚，对顺铂敏感性的影响也未可知。基于上述结果，本研究假设miR-221-5p可通过靶向ALDH1A2基因增加鼻咽癌细胞的顺铂敏感性，并对其进行验证。

1 材料与方法

1.1 材料 人永生化鼻咽上皮细胞NP69及人鼻咽癌细胞系SUNE1、HNE1和CNE2购自中国科学院上海细胞研究所，RPMI-1640培养基和胎牛血清(FBS)购自美国Gibco公司，顺铂(DDP)、RIPA裂解液、胰蛋白……