李遥，杨冯睿，梁峰，侯娇艳，杨艳

（南华大学衡阳医学院附属第一医院 麻醉科，湖南 衡阳 421001）

0 引言

铁死亡（FerroPtosis）是近年发现的不同于细胞凋亡以及细胞坏死的一种新的细胞死亡形式。急性脑损伤后，神经元表现出铁死亡相关的分子特征[1]。而且，铁死亡在帕金森综合征、阿尔兹海默症等神经退行性疾病的病理发展中扮演重要角色[2-3]。右美托咪定（Dexmedetomidine，Dex）是临床麻醉中常用的α2肾上腺素受体激动剂，通过抑制交感神经活动发挥镇痛、镇静作用。有研究报道Dex通过JAK2/STAT3途径抵抗神经元凋亡[4]。但Dex的神经元保护作用是否涉及铁死亡过程还未清楚。本研究采用Erastin诱导原代皮层神经元铁死亡，探讨Dex是否能够铁死亡导致的细胞活力丧失，并观察铁死亡相关蛋白BECN1、GPX4、ACSL4的表达情况。

1 资料与方法

1.1 大鼠原代皮层神经元培养。Wistar大鼠由南华大学医学研究实验中心提供。参照Sahu M P[5]等方法进行皮层原代神经元提取及培养。雌性大鼠交配受孕后独立饲养18 d用于皮层神经元提取。大鼠处死后用70%乙醇消毒，然后切开腹腔从子宫中取出胚胎，将胚胎转移到超净工作台，剪下头部并立即转移到4℃的PBS中。在解剖显微镜下分离大脑皮层部分，切成微小块，然后用0.2%（w/v）木瓜蛋白酶（P3125，Sigma）和0.004%（w/v）DNase溶液（D7073，Beyotime）于37℃消化30 min。将收集的细胞计数，然后将其接种到细胞培养瓶，接种密度为106个/mL。每72 h更换一次培养基。培养7 d后用于实验。

1.2 神经元铁死亡诱导及右美托咪定干预处理。将神原代经元细胞重新接种到孔板，继续培养5 d。铁死亡诱导剂Erastin购于Selleck公司，货号为S7242，将Erastin溶于DMSO，终浓度为50μM[6]。……