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天麻中糖基转移酶基因GeGT1的克隆及原核表达分析

2021-07-21刘梦丽余函纹单婷玉吴君贤彭华胜程铭恩查良平桂双英

中草药 2021年14期
关键词:分析

刘梦丽,余函纹,单婷玉,吴君贤,彭华胜, ,程铭恩,查良平*,桂双英,

1.安徽中医药大学药学院,安徽 合肥 230038

2.中国中医科学院 中药资源中心,道地药材国家重点实验室培育基地,北京 100700

3.安徽省中医药科学院药物制剂研究所,安徽 合肥 230012

4.现代药物制剂安徽省教育厅工程技术研究中心,安徽 合肥 230012

5.药物制剂技术与应用安徽省重点实验室,安徽 合肥 230012

天麻始载于《神农本草经》列为上品,原名“赤箭”,因其茎似箭,端有花,远看如箭有羽而得名[1]。天麻为兰科植物天麻Gastrodia elataBl.的干燥块茎,性甘、平,归肝经,具有息风止痉、平抑肝阳和祛风通络的功效[2]。天麻作为药食同源滋补保健类药材,包含酚类、有机酸类、多糖类等多种活性成分[3-4],具有抗惊厥、镇静催眠、镇痛、保护神经细胞、改善记忆及延缓衰老等药理作用[5]。

糖基转移酶(glycosyltransferase,GTs)是一类高度分化的多基因家族酶,广泛存在于动物、植物和微生物中,GTs能催化糖基团从供体分子转移到特异性受体分子,形成各种糖苷化合物[6-8]。天麻中很多活性成分是以糖苷化的形式存在,包括天麻素、巴利森苷等主要活性成分,糖基化反应是由GTs介导的植物体内的一种重要的次生代谢反应,通过糖基化修饰,能改善天然药物的水溶性、稳定性和生物利用度等[9]。

近年来,已经从霍山石斛[10]、布渣叶[11]、穿心莲[12]、地黄[13]、长春花[14]、花楸[15]等药用植物中克隆出了GTs基因。本研究以天麻作为实验材料,利用反转录聚合酶链式扩增(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆天麻糖基转移酶基因(glycosyltransferase,GeGT1)的cDNA全长序列,构建原核表达载体并转化至大肠杆菌进行表达,研究GeGT1不同器官表达模式,为后期研究GeGT1及其生物学功能奠定了理论基础。……

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