吴哲，邹彩霞，廖锋

高血压导致的心肌细胞超负荷工作会引起心室重塑、心脏肥大等影响射血功能，甚至发展为心力衰竭。目前关于高血压引起的心肌细胞损伤的机制仍不清楚[1]。ATP是心肌细胞的主要能量来源，由线粒体产生。当心肌细胞超负荷工作时会导致活性氧自由基的累积激活线粒体凋亡途径，导致心肌细胞损伤和凋亡[2]。PI3K/AKT对高血压造成的器官损伤具有保护作用，研究显示PI3K/AKT通路过表达可抑制缓解血管紧张素诱导的H9c2心肌母细胞凋亡[3]。研究显示PI3K/AKT通路通过缓解线粒体损伤抑制心肌细胞凋亡[4]。微小RNA（miRNA）是一种长度约为22个核苷酸长度的、高度保守的单链RNA，可在转录后的水平上导致信使RNA（mRNA）的降解或者翻译抑制[5]。最新研究显示miR-124-3p通过抑制PI3K/AKT通路诱导膀胱癌细胞的凋亡[6]。研究显示抑制miR-124-3p可通过抑制心肌细胞的凋亡来缓解急性心肌梗塞[7]。本文分析miR-124-3p在自发性高血压（SHR）大鼠心肌线粒体凋亡中的作用及其对PI3KAKT信号通路的调控机制。

1 主要材料与方法

1.1 主要实验材料SHR大鼠（45只）和健康的同源性WKY大鼠（15只）雄性SPF级，190～210 g，上海斯莱克实验动物中心，中国。miR-124-3p激动剂（agomir）和抑制剂（antagomir），广州瑞博生物技术有限公司。HE染色试剂盒（C0105S）、ELISA和TUNEL染色试剂盒来自（碧云天公司，中国）。Hoechst 33258（Sigma，美国）。RNAspin Mini和miRNeasy Mini试剂盒（GE Healthcare，美国）。Bestar qPCR RT和Bestar™qPCR试剂盒（DBI Bioscience公司，德国）。TaqMan miRNA试剂盒（Thermo Fisher公司，美国）。抗体、一抗和山羊抗免疫球蛋白G（IgG）二抗（1：1000稀释，#ab6721）购于（Abcam公司，美国）。硝酸纤维素膜（EMD Millipore，美国）。ECL 显色试剂盒（Thermo Fisher公司，美国）。显微镜（Carl Zeiss公司，德国）。心肌细胞H2c9（ATCC，美国）。DMEM培养基和抗体（Gibco公司，美国）。Lipofectamine®3000（Invitrogen公司，USA）。……