APP下载

凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定饲料添加剂溶菌酶二聚体的含量

2021-07-21张文刚孙冰清黄士新达列亚阿合买提

养殖与饲料 2021年7期

张文刚 张 妤 孙冰清 姜 芹 顾 欣 黄士新* 达列亚·阿合买提

溶菌酶二聚体是以鸡蛋清溶菌酶单体为原料,将单体溶菌酶聚合为溶菌酶二聚体,分子质量约为28.8 ku。溶菌酶二聚体分子中2 个相邻分子之间的结合方式为共价键结构,其不但保留了单体溶菌酶的酶活性,而且还产生了新的免疫活性。溶菌酶二聚体通过显著增强腹腔巨噬细胞的吞噬率及其吞噬指数,提高血液中性细胞的吞噬率,从而提高断奶仔猪的非特异性免疫功能。这种特性可用于改善仔猪肠道发育,促进营养物质吸收,提高断奶仔猪增重。溶菌酶二聚体作为新型的饲料添加剂产品,其二聚体比例控制在大于总含量的30%。目前,溶菌酶二聚体常用的检测方法有高效液相色谱法和电泳法,与液相方法相比,电泳法具有成本低、操作简单、重复性高等特点[1-2]。

1 材料与方法

1.1 试 剂

柠檬酸、柠檬酸三钠,均购自上海凌峰化学试剂有限公司;三氯乙酸,购自上海凌峰化学试剂有限公司;EDTA、氢氧化钠、丙酮,均购自上海凌峰化学试剂有限公司;溶菌酶二聚体对照品,纯度99.2%,溶菌酶二聚体饲料添加剂(批号为0880、0881、0882、0883),由上海艾魁英生物科技有限公司提供;4-15%Resolving Gel 小型预制胶、10×Tris/Glycine/SDS 电泳缓冲液、Dual Color Marker,均购自伯乐生命医学产品(上海)有限公司;上样缓冲液(自制,4×Laemmli Sample Buffer,购自伯乐生命医学产品(上海)有限公司;β-巯基乙醇,购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司);考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液,购自北京索莱宝科技有限公司。

1.2 仪 器

离心机,德国Eppendorf 公司;……

登录APP查看全文