富含嘌呤盒1 和干扰素调节因子4 在脓毒血症患儿外周血中的表达及其与预后的关系
2021-07-20郑燕冰梁木华郭锦均东莞市滨海湾中心医院儿科广东东莞523900
郑燕冰,梁木华,郭锦均(东莞市滨海湾中心医院儿科,广东东莞 523900)
脓毒血症指的是由严重创伤、全身炎性感染反应、烧伤等导致的全身炎症反应综合征,病情严重者可有多器官功能衰竭而导致患儿死亡。早期预测脓毒血症患儿的病情严重程度,对改善患儿预后意义重大。富含嘌呤盒1(PU1)、干扰素调节因子4(IRF4)为免疫细胞转录因子,可通过参与辅助性T 细胞分化发育、增殖、调节细胞因子分泌等生物过程,纠正机体免疫紊乱,抑制炎性反应[1]。本研究以我院收治的80例脓毒血症患儿为研究对象,探讨外周血PU1、IRF4的表达情况及临床意义。
1 资料和方法
1.1 病例与分组
选取我院2019 年1 月-2020 年10 月收治的80 例脓毒血症患儿为研究对象,纳入标准:(1)符合脓毒血症临床诊断标准[2],且为初次确诊;(2)可按要求定期随访,临床资料完整;(3)患儿及其家属均签署知情同意书。排除标准:(1)近期接受过手术治疗者或有重大外伤史者;(2)近期存在感染性疾病者。根据急性生理与慢性健康-Ⅱ(APACHE-Ⅱ)评分将80 例患儿分为危重组(APACHE-Ⅱ评分≥15 分,38 例)、非危重组(APACHE-Ⅱ评分<15 分,42 例)。选择同期入院行健康体检者40 例作为对照组。危重组男20 例,女18例;年龄5~13 岁,平均(9.15±1.02)岁。非危重组中男22 例,女20 例;年龄5~14 岁,平均(9.28±1.05)岁。对照组中男21 例,女19 例;年龄5~14 岁,平均(9.19±1.06)岁。3组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 外周血单个核细胞制备 患儿入院时,单次取患儿外周血10 mL,分离血细胞及血浆,血浆低温保存备用。EDTA 抗凝下,以密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)。
1.2.2 PCR 步骤 (1)逆转录。采用Titan One Tube RT-PCR Kit试剂盒,按比例配置反转录反应液,将RNA及反应液于37 ℃反应15 min,98 ℃酶失活5 min,结束反应,产物4 ℃保存备使用。……
