许 训，刘 薇，刘 昆，袁康瑞，叶晓梅，刘小柳，吴都督，陈 稚* （广东医科大学.动物中心；.药学院，广东东莞 5808；.广东省深圳市罗湖区人民医院医学检验科，广东深圳 58000）

氧化应激和抗氧化防御的失衡与阿尔兹海默症(AD)等多种疾病密切相关[1-3]。近年来，中药用于AD的治疗受到国内外学者的重视[4-9]。柴胡加龙骨牡蛎汤（CLM）源于仲师之《伤寒论》，其方药由小柴胡汤去甘草加桂枝、茯苓、龙骨、牡蛎、铅丹、大黄而成，具有化饮理肝、阴阳调和之功效[10]。现代药理学研究表明，CLM 具有抗氧化、衰老、抗炎等作用[11]，在治疗抑郁、癫痫、痴呆等疾病方面也有较好的疗效[12-13]，如肖慧琼等[14]发现CLM 能降低颞叶癫痫患者血清中的MDA 含量，增加SOD 活性，抑制脂质过氧化反应。因此，本研究探讨CLM 对氧化应激导致的神经元损伤的保护作用及其机制。

1 材料和方法

1.1 材料与制作

柴胡、龙骨、生姜、人参、去皮桂枝、茯苓、洗半夏、黄芩、铅丹、大黄、牡蛎、擘大枣（广东时珍制药有限公司），按原方比例即柴胡62 g，龙骨、生姜、人参、去皮桂枝、茯苓各23 g，洗半夏20 g，黄芩16 g，铅丹23 g，大黄31 g，熬牡蛎23 g，擘大枣6 枚称取定量的药材，再量取5 倍量的75%乙醇，将药材浸泡120 min之后，加热回流，收集滤液；再重复一次上述过程，收集滤液。将两次的滤液收集于同一烧杯中，过滤、浓缩，制成浓度为10 g/mL CLM母液。小鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12 细胞株(上海细胞库)；二甲基亚砜(索莱宝)；DMEM 高糖培养基，0.25%胰蛋白酶（含EDTA），胎牛血清(GIBCO，美国)；H2O2溶液(AR)(Sigma)；细胞裂解液(RIPA）（碧云天)；超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒(南京建成生物工程公司)，乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒；……