刘杉杉，孙伟，郭盈盈，李加英，田维倩，冉钢

（1.铜仁职业技术学院 贵州铜仁 554300；2.民族中兽药分离纯化技术国家地方联合工程研究中心 贵州铜仁 554300）

健康动物机体肠道内存在的大肠杆菌，多数并不致病。作为动物肠道内的共栖菌，大肠杆菌还能够产生抑制致病性大肠杆菌生长的大肠杆菌素。近年来，随着各种抗生素的滥用，大肠杆菌的耐药性呈显著增加的趋势[1]，以往的很多特效药效果变差甚至无效。宠物感染大肠杆菌不仅能影响到治疗效果，而且携带耐药基因的大肠杆菌可能会感染人，影响人类健康和疾病治疗效果[2-4]。我国多省份都有关于宠物犬大肠杆菌耐药性严重情况的报道[5-7]。

铜仁市某养殖场从建立至现在已有数年，从未进行大肠杆菌耐药性试验分析。为了解该养殖场大肠杆菌耐药的具体情况，本研究将从该养殖场采集2 只健康犬肛门拭子，分离大肠杆菌，进行耐药性分析。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与培养基

头孢噻吩、四环素、环丙沙星、庆大霉素、萘啶酸和氧氟沙星药敏纸片由Oxoid 公司生产。

普通LB 琼脂和液体培养基、胰酪胨大豆肉汤培养基、麦康凯琼脂培养基均由青岛海博生物公司提供。

1.2 样品采集

采集养殖场2 只健康犬肛门拭子样品，置于装有0.85%无菌生理盐水的样品采集管中，常温保存备用。采集过程中要注意对样品做好标记，谨防样品污染。

1.3 大肠杆菌分离鉴定

将含有肛门拭子的样品采集管涡旋振荡混匀，静置后用接种环取上清液1～2 环进行涂片，室温下自然干燥，经火焰固定后，进行革兰氏染色，并在显微镜下观察细菌形态。……