毕国善，张侠陵，刘辉，陈洁，罗东阳，熊国祚

（1.南华大学附属第二医院 血管外科，湖南 衡阳 421001；2.湖南省常德市第一人民医院 心血管外科，湖南 常德 415000；3.湖南省益阳市中心医院 血管外科，湖南 益阳 413000）

糖尿病下肢血管病变是糖尿病患者常见的并发症之一[1]，约占糖尿病并发症的20%，是导致患者截肢的主要原因，严重影响糖尿病患者的生命健康[2]。而目前无论药物、外科转流术以及介入治疗远期疗效都不能令人满意[3-4]。近年来，通过促血管新生改善缺血部位血液循环，已成为治疗糖尿病下肢缺血重要方法[5-7]。小凹蛋白1（caveolin-1）是一种信号转导蛋白，通过分子表面的“脚手架”区能与多种信号分子相互作用，在多种疾病中起着重要调控作用[8-9]。有研究报道，caveolin-1可促进血管新生，并参与糖尿病病理过程[10-11]，笔者推测caveolin-1可能在糖尿病下肢缺血中发挥着重要作用，因此，本研究主要探讨caveolin-1对糖尿病下肢缺血部位血管新生的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物80 只健康SD 大鼠，雄性，（200±20）g，8～10 周，从南华大学动物实验部购买。

1.1.2 实验仪器SZ-93 自动双重纯水蒸馏器（亚荣，上海）；三用恒温水浴箱（中国）；Eppendorf 型高速离心机 （5804 型、5804R 德国）；ELX800 型酶标仪（BioTEk，美国）；微量移液器（Select Bioproducts，美国）；OLYMPUS 显微镜与显微摄像系统（BX51 型，日本）；Sartorius电子天平（BSA223S，美国）；Sanyo -80 ℃冰箱（日本）。

1.1.3 实验试剂pCDNA3.1（+）caveolin-1（南华大学药物药理研究所赠送）；链脲菌素（STZ，Sigma，美国）；兔抗大鼠caveolin-1 抗体（博奥森生物，中国）；兔抗大鼠eNOS 抗体（博奥森生物，中国）；NO 检测试剂盒（建成生物公司，中国）；DAB 显色试剂盒（艾杰生物，中国）；柠檬酸三钠（大茂化学，中国）；……