陈广，魏东，苏琨，雷学芬，王滔，洪茂林，房立锐

1昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科，昆明650000；2昆明医科大学第二附属医院肿瘤科

原发性胆囊癌是一种起源于胆囊黏膜上皮的恶性肿瘤，在全世界范围内其发病率居消化道肿瘤的第六位［1］。全球不同地区发病率有较大差异，发达国家发病率低，发展中国家发病率高，甚至有些种族和地区达到了流行病水平［2-3］。胆囊结石、慢性胆囊炎、胆囊息肉、肥胖等是胆囊癌的主要病因［4］。由于胆囊癌早期症状不明显，且缺乏常规的敏感筛查测试，胆囊癌早期诊断困难，超过50%的胆管癌和胆囊癌在晚期才被诊断，大多数患者已经出现远处转移或淋巴结转移，失去了最佳手术机会，只有小部分患者能进行根治手术［5-6］，患者5年总生存率仅为5%［7］。胆囊癌的复发、侵袭、转移仍是患者的主要致死原因。因此，加强胆囊癌相关分子机制的研究具有十分重要的临床意义。WWOX基因是2000年Bednarek等通过鸟枪基因测序技术鉴定和克隆出来的一种新的抑癌基因。我们前期研究发现，WWOX通过上调p53家族转录因子、p53上调凋亡调节因子的表达诱导胆囊癌细胞凋亡，然而WWOX对胆囊癌细胞迁移、侵袭的调控作用及机制仍不明确。2019年6月—2020年1月，本研究对此做了探讨。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂及仪器 胆囊癌细胞系GBC-SD购自中国科学院昆明动物所细胞库。WWOX慢病毒质粒EX-S0456-Lv201购于广州Genecopoeia公司。胎牛血清购自美国Gibco Life Technologies公司，EDTA-胰酶购自美国Millipore公司，Matrigel基质胶、Transwell小室购自美国Corning公司。WWOX、转化生长因子β1（TGF-β1）一抗分别购自美国Proteintech group公司、英国Abcam公司。……