芳香烃受体新生鼠高氧肺损伤中的表达和调节机制*
2021-07-13王丽珍羊才进谢五菊
王丽珍 ,羊才进 ,谢五菊 ,李 玲△
(海南西部中心医院 1.儿科;2.呼吸内科,儋州 571700)
关键字 支气管肺发育不良;高氧;芳香烃受体;白介素33
支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)为引起持续性呼吸窘迫的慢性肺部疾病,是早产儿(妊娠期<37周)常见疾病之一[1]。由于子宫内胎肺的成熟过程是处于低氧环境,因此暴露于过早的高氧环境中会导致严重的新生儿肺损伤,从而促进BPD 的发生发展[2]。而高氧导致BPD 的分子机制仍不明确。研究表明,白介素(IL)-33在高氧环境下调控炎症因子的分泌加速BPD 的发生发展[3]。芳香烃受体(the aryl hydrocarbon receptor,AhR)作为一类配体激活的转录因子,参与调控一系列应对环境刺激的分子反应[4]。近年来,AhR 越来越多的被认为是调节免疫细胞应答环境改变的重要分子,同时也参与炎症以及癌症的病理过程[5]。研究表明,在高氧环境下,AhR 减轻新生鼠肺组织的损伤程度[5],但AhR 调节高氧条件下新生鼠肺损伤过程的机制仍未被阐明。由于新生鼠肺组织结构与妊娠26~28周的胎儿肺组织相似[6],因此本研究利用高氧新生鼠肺损伤模型初步探究阐释AhR 对新生儿高氧肺损伤的保护机制。
1 材料与方法
1.1 主要试剂 小鼠肺上皮细胞系MLE-12购自上海ATCC 细胞库;C57BL/6J 小鼠购自美国Jackson实验室;培养基和胰蛋白酶购自美国Hibco 公司;6孔板和培养瓶购自美国Coring公司;RIPA和胎牛血清购自北京索莱宝试剂有限公司;BCA蛋白检测试剂盒购自上海碧云天生物试剂有限公司;AhR、IL-33、GAPDH 引物购自上海生工公司;PVDF 膜购自美国Millipore 公司;ECL 发光液购自美国Promega公司;Myc、AhR、和GAPDH抗体购自美国Cell Signaling公司;IL-33 ELISA kit、L-Kynurenine购自英国Abcam公司。……
