茄子1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶基因的生物信息学及其响应逆境胁迫的表达分析
2021-07-10万发香王连臻高军
万发香,王连臻,高军
(淮阴工学院生命科学与食品工程学院,江苏 淮安 223003)
乙烯是一种重要的植物激素,在植物花的发育[1-2]、果实的成熟[3-5]、遭受机械损伤[6-7]和生物与非生物胁迫[8-10]等过程中具有重要的调控作用。而1-氨基环丙烷-1- 羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)合成酶(ACC synthase,ACS)是植物体内调节乙烯形成的关键酶和限速酶。ACC 合成酶(ACS)是以磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate,PLP)为辅酶的酶家族,在高等植物中由多基因家族编码[11]。已在多种植物中发现了编码ACC 合成酶的ACS基因,其中:拟南芥中存在12 个ACS基因[12],番茄中至少存在9 个[7],水稻中存在5个[11,13],西葫芦中至少有2个[11],枇杷中至少有2个[14]等;并且在牵牛花[2]、猕猴桃[15]、香蕉[16]、西瓜[17]、葡萄[18]、桃[3]、番木瓜[19]、荔枝[20]、李[21]、甘蔗[22-24]、茶树[25]和树莓[26]等作物中也有ACS基因的相关研究报道。
茄子是生长在热带和温带地区的一种重要的蔬菜作物,而目前关于茄子中与乙烯生物合成相关的ACS基因的研究报道相对较少。因此,基于本课题组前期得到的茄子低温转录组数据,筛选到1 个显著差异表达基因,并根据该基因编码的氨基酸序列,经NCBI 数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中的Blastp比对,发现其属于编码ACC合成酶的基因ACS。在此基础上,对其进行系统的生物信息学分析,同时,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)探究其在低温、高温、干旱和盐胁迫处理不同时间后的表达情况,从而为进一步探索与逆境胁迫相关的茄子ACS基因(SmACS)的生物学功能研究提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 生物信息学分析
使用MEGA X 软件,通过最大似然法(maximum likelihood,ML)构建基于茄子SmACS与拟南芥、番茄和烟草等10个物种同源蛋白的系统进化树;……