陈思琦，李佳欣，葛鹏玲

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一种多病因的代谢性疾病，其特征是由于胰岛素释放紊乱、胰岛素作用失调或两者兼而有之造成的慢性高血糖[1]。2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)占糖尿病的90%以上，目前认为T2DM的主要发病机制为胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)，IR贯穿了2型糖尿病发生发展的全过程[2-3]，同时也是高血压、冠心病、动脉硬化、肥胖等多种疾病共同联系的病理基础。神经酰胺(ceramides，Cer)是鞘脂(sphingolipid，SPL)的重要中间代谢产物，对鞘脂类的生物合成具有重要意义[4]。近年来研究表明[5]，神经酰胺代谢异常参与胰岛素抵抗等疾病的病理生理过程，神经酰胺可通过抑制Akt 磷酸化从而影响胰岛素信号通路，进而导致胰岛素抵抗的发生。

在前期研究中，我们发现IR细胞中KDSR(3-ketodihy-drosphingosine reductase，3-酮二氢鞘氨醇还原酶)基因表达上调，且通过调控神经酰胺/PKCζ/Akt/Foxo1信号通路而引发IR。花旗泽仁是治疗2型糖尿病胰岛素抵抗疗效确切的临床经验方，包括西洋参、泽泻、薏苡仁三味中药，本课题组前期已证实花旗泽仁具有明显的改善胰岛素抵抗的作用，本文以前期研究为基础，从KDSR基因角度探讨花旗泽仁改善IR的作用机制。

1 材料

1.1 HepG2细胞系HepG2人肝癌细胞株(FH0067)，购于上海中医药大学，保存于黑龙江中医药大学方剂学重点实验室。

1.2 试剂西洋参(批号：120997)、泽泻(批号：020001421)和薏苡仁(批号：17052009)购于河北润和医药有限公司，罗格列酮(批号：122320-73-4)购于阿拉丁试剂(上海)有限公司；KDSR过表达质粒由通用生物系统有限公司提供；β-actin由英国Abcam公司提供；KDSR抗体、PKCζ抗体、p-PKCζ抗体、Akt2抗体、p-Akt2抗体、Foxo1抗体、p-Foxo1抗体由美国CST公司提供；……