胡 爽，辛传伟，羊 波，夏仲尼

(浙江省中医药研究院，浙江省立同德医院·浙江 杭州 310012)

糖尿病肾病(diabetic kidney disease.，DKD)是糖尿病患者常见且严重的微血管并发症。研究表明，DKD占终末期肾病(end-stage renal disease，ESRD)的30%～47%，是引起终末期肾病的最常见诱因[1-2]，其发病机理和防治途径是医学界研究的热点。肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells，MC)是肾小球内的固有细胞，在各种病理因素作用下，MC凋亡造成的系膜细胞缺失是糖尿病肾损伤的重要机制[3]。因此，研究寻找抑制MC凋亡的有效药物，具有重要的意义。消渴平合剂(Xiaokeping，XKP)作为医院制剂，前期研究表明该药有改善胰岛素抵抗、保护大鼠肾功能等作用[4-5]；但尚未见消渴平对MC凋亡的研究报道。本实验通过观察消渴平对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响，探讨其防治 DKD的作用机理。

1 材料与方法

1.1 细胞 肾小球系膜细胞株HBZY-1：购自赛百慷(上海)生物技术股份有限公司。

1.2 药物与试剂 消渴平(黄芪、生地黄、丹参、山药、菊花、麦冬、天花粉、枸杞子等配方组成)：浙江省中医药研究院制剂室生产。DMEM培养基：Hyclone；胎牛血清：浙江天杭生物科技股份有限公司；TUNEL凋亡试剂盒：生工生物工程(上海)股份有限公司；兔抗 cleaved caspase-3：美国 Cell Signaling；兔抗 Bax、Bcl-2、细胞色素 C (Cytochrome c，Cyt-C)抗体：英国 Abcam。

1.3 血清制备 取SPF级雄性健康SD大鼠40 只，体质量(200±20) g，购于上海斯莱克动物实验有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2017-0015，按实验动物管理使用指南饲养。含药血清分别使用消渴平高浓度(2 g·mL-1)、低浓度(0.5 g·mL-1)的浓缩液对大鼠进行灌胃。正常对照组则给予等体积的生理盐水。连续给药7 d，最后一次给药后2 h无菌操作心脏采血，分离血清，置于-20 ℃冷存备用。……