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手工克隆生产猪胚胎关键技术的改进研究

2021-07-08陶瑞鑫贾超武恩在李娟

畜牧与兽医 2021年7期
关键词:方法

陶瑞鑫,贾超,武恩在,李娟*

(1.南京农业大学动物科技学院,江苏 南京 210095;2.淮安市南农大新农村发展研究有限公司,江苏 淮安 223005)

体细胞核移植技术(somatic cell nuclear transfer, SCNT)是生产克隆动物的一项核心技术。该技术将已分化的体细胞与去核卵母细胞胞质进行融合,经过一系列改变,供体染色质组织特异性的基因修饰信息将被擦除,并接受卵母细胞胞质内的信息表现出一种新的转录模式[1]。所得重构胚胎在体外完成激活和早期发育后移植入受体母畜子宫内,繁殖出具有相同基因型后代。早在2000年,科学家利用成年猪体细胞成功获得第一例SCNT克隆仔猪[2]。同样使用猪耳皮肤细胞作为供核体细胞,通过SCNT培育出莱芜猪克隆后代,为地方猪保种及育种提供了新途径[3]。近期为了应对非洲猪瘟疫情对地方猪遗传资源的威胁,利用SCNT已成功获得纯种青峪猪仔猪[4]。SCNT还可与CRSPR/Cas9技术结合,获得基因编辑克隆猪[5]。因此,SCNT技术在猪的种质资源保护、异种移植及疾病动物模型等领域具有较好的科学意义和应用前景。

虽然利用SCNT技术相继获得了羊、猪、猴等哺乳动物克隆后代[6-8],但受多种因素的影响,猪的克隆效率依旧相对较低[9]。影响克隆胚胎发育效率的因素较多,包括SCNT的技术方法、卵母细胞、供核细胞的质量等。其中,作为受体细胞质的去核卵母细胞则是影响重构胚胎发育能力的一个重要因素,因为卵母细胞细胞质中储存着大量mRNA、蛋白质、营养物质及发育相关因子等支持重构胚胎早期发育的主要物质[10-11]。……

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