马晓菁 ， 谢彩云 ， 刘丽娅 ， 叶 锋 ， 谷文喜 ， 钟 旗 ， 易新萍

(新疆畜牧科学院兽医研究所 ， 新疆 乌鲁木齐 830011)

伯氏疏螺旋体(Borreliaburgdorferi,B.burgdorferi)属螺旋体科(Spirochaetaceae)疏螺旋体属(Borrelia),是莱姆病(Lyme disease)的病原体。莱姆病呈世界性分布，主要通过携带病原体的蜱虫叮咬传播，至少有30多个国家报告有莱姆病的存在，且发病区域和发病率呈上升趋势[1]。我国于1986—1987年在黑龙江省海林县首次从病原学上证实莱姆病的存在[2]。全国已经有19个省、市、自治区确定存在莱姆病的自然疫源地[3]。目前我国莱姆病新发病例高达2万余例,且发病率和发病人数呈上升趋势[4]。莱姆病主要的诊断方法包括病原体检测、免疫学检测以及分子生物技术检测。其中伯氏疏螺旋体的获得为莱姆病的诊断提供确凿证据，但在临床样本中伯氏疏螺旋体数目稀少，且培养周期较长，使其检测在临床中应用受到限制[5]。同时由于伯氏疏螺旋体抗原成分的复杂性，以及各亚种之间存在抗原差异，使得莱姆病的免疫学诊断受到了挑战[6]。莱姆病分子水平的检测主要以PCR技术为基础，巢氏PCR和实时荧光定量PCR技术较为广泛的应用于伯氏疏螺旋体的检测[7-8]。重组酶介导等温核酸扩增(Recombinase aided amplification,RAA)技术，利用来自于大肠杆菌的 recA 重组酶替代PCR高温解链，在单链 DNA 结合酶(Single-stranded DNA binding，SSB)和DNA聚合酶的共同作用下使DNA 片段在体外快速地扩增[9]。与常规的PCR技术相比，RAA技术不需要专业的PCR仪，反应温度低，反应速度快。本研究选取伯氏疏螺旋体16S rRNA基因保守序列设计引物，采用RAA技术电泳法，旨在为伯氏疏螺旋体检测提供了一种简便、快速的手段。……