韩 旭 ， Eager Wayne Johnson ， 夏兆飞

(1.中国农业大学动物医学院 ， 北京 海淀 100193 ； 2. 北京恩睿康农业技术咨询有限公司 ， 北京 昌平 102209)

北京地区某个500头母猪场，2019年10月保育猪死亡率高达4%。主要表现为断奶后2周开始出现明显呼吸道症状，喷嚏、咳嗽、腹式呼吸，体温升高至40～40.5 ℃，精神沉郁，厌食，个别母猪有轻度腹泻。送检4头35～55日龄保育猪进行剖检。

1 剖检病变及样品采集

4头病猪的肺脏均有不同程度的肉样变，2头猪鼻腔有脓性分泌物，提示可能有细菌感染，应进行细菌学和病理学检查。4头猪腹股沟淋巴结有不同程度的肿大，应进行PCR及病理学检查。1头猪结肠襻严重水肿、充血、轻度出血，应进行细菌学和病理学检查。其他器官未见眼观可见病变。

细菌分离培养样品：肺脏、鼻腔脓汁、关节液及脑组织。PCR检测样品：肺脏及淋巴结。病理学检查样品：肺脏间叶、心叶、膈叶，大脑、小脑、扁桃体、心肌、肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠，均置于10%福尔马林溶液中固定。

2 细菌学检查

将用于细菌培养的组织接种于血平板、CNA平板(血平板加入萘啶酸及硫酸黏杆菌素以选择性培养革兰阳性菌)、麦康凯平板进行细菌分离培养，培养基购自Oxiod公司，并自行配置。

经检查，从1头猪的肺脏及鼻腔脓汁中分离到β溶血性针尖状小菌落，革兰染色镜检为革兰阳性球菌，疑为链球菌。对疑似菌落进行PCR扩增16S rRNA片段并测序，使用细菌通用型引物27F(5′-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3′)和1492R(5′-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3′)[1]，测序可知溶血性小菌落为猪链球菌(Streptococcussuis)。参照Okura等建立的两步多重PCR方法对分离到的链球菌进行血清型检测[2]。……