肝螺杆菌感染对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠慢性结肠炎模型的影响

2021-07-03吴志浩朱立麒

实验动物与比较医学 2021年3期

吴志浩，沈宸，殷俊，朱立麒，张泉,2

(扬州大学兽医学院，扬州225009；2．扬州大学附属医院，扬州 225001)

肝螺杆菌（Helicobacter hepaticus，H.h）是一种革兰阴性菌，在某些易感小鼠品系中感染率较高，可引起肝脏和肠道疾病[1]，对实验动物质量及实验动物疾病模型构建能造成一定影响。炎性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）是一种复杂的肠道疾病，可分为克罗恩病和溃疡性结肠炎，罹患这两类IBD后患者通常因肠道长期过度的炎性反应出现便血和体质量减轻[2]。已知白细胞介素10（interleukin 10，IL-10）敲除（IL-10-/-）小鼠能够感染H.h并引起结肠炎[3]，常用于结肠炎模型的建立。使用葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium，DSS）诱导的结肠炎可作为IBD的疾病模型[4]。然而处于非无菌环境中的小鼠可能因感染H.h而对结肠炎模型造成一定影响。本研究旨在用DSS诱导感染H.h的小鼠制备IBD模型，探究H.h感染对DSS慢性结肠炎模型的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物及菌株

IL-10-/-小鼠（B6.129P2-IL10tmlCgn/J）购自美国Jackson实验室，饲养于扬州大学比较医学中心SPF级动物设施[SYXK（苏）2017-0044]。环境温度（26±2）℃，相对湿度40%～60%，昼夜12h更替。实验前小鼠H.h检测均呈阴性。H.h（ATCC51449）购自美国模式培养物保藏中心，保存于－80℃备用。

1.2 主要试剂

DSS购自上海翊圣生物科技有限公司；苏木精和伊红购自国药集团化学试剂有限公司；TRIzol购自美国Invitrogen公司；PrimeScript RT Regent Kit with gDNA Eraser购自日本TAKARA公司；Universal SYBR Green Master购自瑞士Roche公司；白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的PCR引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成；信号转导和转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）、磷酸化STAT3（phosphorylation-STAT3，p-STAT3）和β-肌动蛋白（β-actin）抗体购自美国Cell Signaling Technology公司；超敏化学发光试剂购自苏州新赛美生物科技有限公司。