付宏煜，谢小芳，范银银，朱志宸，徐塑凯，杜鸿(苏州大学附属第二医院检验科，江苏苏州215004)

肠杆菌科细菌对碳青霉烯耐药主要的机制是产KPC(Ambler A类)、NDM、VIM和IMP(B类)[1]和OXA-48样(D类)β-内酰胺酶[2]。产OXA-48样碳青霉烯酶肠杆菌科在不同生态系统中的快速传播给临床带来巨大挑战[3]。目前已报道的OXA-48样碳青霉烯酶包括OXA-48[4]、OXA-162[5]、OXA-181[6]、OXA-204[7]、OXA-232[8]、OXA-244[9]、OXA-245[9]、OXA-247、OXA-436、OXA-484、OXA-519。其中，OXA-232在中国最普遍[10]，与国外常见OXA-48样酶的流行趋势不同[11]。近年来，OXA-232样肠杆菌科在中国开始出现[12-13]，以肺炎克雷伯菌最为常见。我国不同地区产OXA-232肺炎克雷伯菌(OXA-232-producingK.pneumoniae，OXA-232Kp)的分子流行病学特征与遗传环境所知甚少。

OXA-232Kp的克隆性传播多次在上海[10，14]、浙江[15]报道，尚未发现OXA-232Kp在江苏地区的报道。本文首次调查江苏地区临床OXA-232Kp的流行病学特征，包括药敏分析、耐药基因检测、克隆性及质粒的相关性。

1 材料与方法

1.1菌株来源 收集2018年9月至2019年9月江苏地区5家医院(盐城市第一人民医院、苏州大学附属第二医院、苏州市立医院、张家港市第一人民医院和苏州市吴中人民医院)临床连续分离的非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistantKlebsiellapneumoniae, CRKP)菌株，根据2020年美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)指南M100，亚胺培南、美罗培南和厄他培南最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)>2 μg/mL为耐药，至少对其中一种药物耐药的肺炎克雷伯菌判定为CRKP。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定。质控菌株肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705和ATCC BAA-1706、大肠埃希菌J53由本实验室保存。

1.2主要仪器与试剂 MALDI-TOF MS仪(德国Bruker公司)，Phoenix-M50全自动细菌鉴定仪及配套药敏板卡、琼脂糖凝胶核酸电泳仪、凝胶成像系统分析仪(美国Bio-Rad公司)，PCR扩增仪(美国Applied Biosystems公司)，NanoDrop 2000超微量分光光度计(美国Thermo公司)，麦氏比浊仪(法国生物梅里埃公司)；胰……