双重过滤法联合MALDI-TOF MS快速检测尿液病原菌*
2021-07-02徐金莲陈学兵李书琴肖学会王沛荆门市第一人民医院检验科湖北荆门448000
徐金莲,陈学兵,李书琴,肖学会,王沛(荆门市第一人民医院检验科,湖北荆门448000)
尿路感染是人类较常见的感染性疾病,作为诊断金标准的中段尿细菌定量培养耗时长且存在培养阴性现象,不利于临床快速诊断及排除尿路感染。UF1000i尿沉渣自动化分析仪能准确提供白细胞和细菌含量,常用于尿路感染的筛查。全自动细菌鉴定分析仪虽可于当日完成病原菌鉴定,然而鉴定前需培养出单菌落。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)具有快速鉴定病原菌的优点,可将已培养的病原菌鉴定时间缩短至数分钟,成为临床实验室的常规鉴定方法[1]。MALDI-TOF MS还能直接检测阳性血培养和尿液等体液中的病原菌,省去了培养环节,进一步缩短了病原菌的鉴定时间[2-3]。由于标本中存在影响质谱峰质量的细胞、蛋白质等干扰因素,需要对标本中病原菌富集纯化后方可提高MALDI-TOF MS鉴定的准确率。目前国内外学者采用的富集纯化方法处理时间均较长,操作繁琐。本研究利用UF1000i细菌计数结果对中段尿标本进行初筛,应用2个针式过滤器组成的双重过滤器对初筛阳性的中段尿标本进行双重过滤以富集纯化病原菌,运用MALDI-TOF MS对滤膜上富集的病原菌进行鉴定,旨在为临床尿路感染病原菌的快速诊断提供简单可靠的检测方法。
1 材料与方法
1.1标本来源及处理 收集2020年5—8月荆门市第一人民医院门诊及住院疑似尿路感染患者中段尿标本1 583份。标本采集量约20 mL,并分为3份,分别用于细菌定量培养及鉴定、UF1000i细菌计数和细菌计数阳性标本的过滤集菌及鉴定。……
