陈涛

自然界中的细菌种类繁多，分布广、数量大、繁殖快、代谢活力强、易变异，大大增加了细菌鉴定的难度。在细菌鉴定中，为了获得准确的结果，需要注意相关事宜。下面分享有关细菌鉴别的一些知识。

1细菌鉴定方法

细菌（Bacteria）是指生物的主要类群之一，属于细菌域。细菌对人类活动有较大的影响：一方面，细菌是许多疾病的病原体，可通过多种途径（如消化道、接触、呼吸道、蚊虫叮咬等）在正常人群中传播，具有较强的传染性，对社会造成的危害较大;另一方面，人类也时常利用细菌，如乳酪、酸奶和酒酿的制作，部分抗生素的制造，废水的处理等。

细菌鉴定是指将未知细菌按生物学特征放入系统中某一适当位置，和已知菌种比较其相似性，通过对比分析方法确定细菌分类地位的过程。常用的细菌鉴定方法有：（1）生物鉴定法，主要利用细菌对营养物质分解能力的差异以及代谢产物的差异进行细菌鉴定，如糖分解产物试验、氧化酶试验等。（2）血清学鉴定，适用于含较多血清型的细菌，常用的方法有玻片凝集试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验、协同凝集试验等，也属于血清学鉴定方法。（3）分子生物学检测，较适用于人工培养基无法生长、生长速度缓慢、对营养要求高、不易培养的细菌，如核酸杂交、生物芯片、核酸扩增技术等。（4）微生物自动鉴定系统鉴定，能快速、准确地鉴定常见分离菌，在临床应用较广泛。（5）质谱技术，这是一种新型技术，灵敏度高。

2细菌鉴定注意事项

2.1 确保纯培养物

若一个菌落的所有细菌来源一个亲代细胞，那么称这一菌落为“纯培养”。一般而言，直接从植物、动物、一般环境中分离出来的细菌，较少获得纯培养。细菌鉴定的第一步是获得每种细菌的纯培养物，因为混合培养物的特征试验反应不可用于鉴定。获得纯培养物的技术需要根据所研究的菌株而选择，常用的方法包括涂布平板法、倾注平板法、平板划线法、厌氧法、富集培养法、单细胞挑取法等。不纯培养物比较普遍的来源是选择性或抑制性培养基上的单个菌落挑取物，因此，在纯化以及验证过程中，尽量避免选择使用此类培养基。

2.2 关注菌株的形态学

形态学指的是菌落的形态、液体培養生长状况、细胞个体形态以及微生物细胞的超显微结构等。近年来，我国微生物技术迅速发展，细胞鉴定技术随之进步，但部分基层工作人员并未重视形态学的研究。最初的微生物分类标准以形态为主，即以形态特征为基本特征进行分类，这一方法应用广泛，建议作为细菌鉴定的第一步。细菌形态是一种稳定的特征，对环境的影响具有独立性。从遗传的角度分析，即使是单个基因突变，通常也不会引起较大的形态改变。在实际工作中，相差显微镜非常有用，它可观察到活体，且可避免电镜术中染色或干燥和色埋造成的破坏。革兰氏反应仍是目前最常见、最有效的染色方法，应用相差显微镜也较为方便。细菌鉴定中可根据细菌具有荚膜、芽孢、鞭毛、菌毛等特殊结构的形态学特点对细菌进行分类。

2.3 尽量少数目的试验鉴定

从实践观点出发，细菌鉴定所需的试验数目应尽量保持在最低标准。基于数百个特征试验中，选择一个快速简便地鉴定所要研究的细菌的试验类型十分有必要。了解菌株来源以及原始分离对细菌鉴定是有益的，根据这种资料及纯化程序，比较容易获得形态学与革兰染色反应的细节反应，经常用于研究对象缩小到少量的属。例如，由好氧的非选择性培养基上分离的革兰阳性、产运动孢子的杆菌，基本上可肯定其是芽孢杆菌（Bacillus），而且无需将其与专性厌氧菌、革兰阴性杆菌、革兰阳性杆菌等细菌鉴定分析。

3结语

细菌鉴定是实验室工作的重要内容，可帮助明确细菌的种类、特征，辅助各项工作的开展。同时，需要注意相关事宜，确保细菌鉴定工作的准确性与有效性。