邹 昊， 田寒友， 白 京， 王 辉， 史宇璇， 乔晓玲*

(1.中国肉类食品综合研究中心，北京 100068；2.肉类加工技术北京市重点实验室，北京 100068)

基于菌株的生长可被特定抗生素抑制的原理，微生物法是目前应用最为广泛的检测食品中抗生素残留总量的方法[1]。其中，利用嗜热脂肪地芽胞杆菌(Geobacillusstearothermophilus)对多种抗生素敏感[2-3]、繁殖速度快和产芽胞可长期保藏等特点开发的试管扩散法已成为检测鲜乳及其他动物源性食品中抗生素残留总量的标准方法[4-9]。现行的标准方法中，在制备芽胞悬液的过程中没有将芽胞与营养体细胞分离，而是通过热水浴((80±2) ℃，10 min)的方式将营养体细胞杀死[7]。这样制备的芽胞悬液因含有死亡的营养体细胞，主要存在以下两个问题：首先，因为每次制备的芽胞悬液中营养体细胞的数量都不固定，所以只能通过菌落计数的方式来确定芽胞的浓度，需要培养48 h，延长了检测管的制备时间[10]；其次，由死亡的营养体细胞分解产生的胞壁肽等物质可诱导芽胞萌发，易导致检测管在保藏过程中失效，缩短了检测管的保质期[11-12]。因此，在制备芽胞悬液的过程中，对芽胞进行纯化是很有必要的。国内外的学者在相关研究中也介绍了芽胞纯化方法，Georget等[13-21]通过反复离心并倾倒上清液的方式去除混悬液中的营养体细胞。Finley等[22-26]在离心法的基础上加入了酶解和超声等环节以提高芽胞纯化效率。但这些方法或多或少都存在着制备时间长、操作繁琐以及所需的仪器和试剂较多等问题。……