刘如月，范京惠，刘 涛, 苑军辉，李清艳，翟向和*，左玉柱*

(1. 河北农业大学动物医学院/科教兴农中心，保定 071001； 2. 瑞普(保定)生物药业有限公司，保定 071001； 3. 行唐县动物卫生监督所, 行唐 050600)

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)主要引起新生仔猪水样腹泻，致死率高达80%～100%[1]。自1973年，猪流行性腹泻在我国多有发生[2]，2010年，在我国大规模暴发，给我国生猪产业带来了严重的损失[3]。目前，市面上商品化的灭活疫苗和弱毒活疫苗不够安全[4]。所以，研制一种安全且有效的新型PED疫苗就显得尤为重要。

PEDV主要编码E、S、M和N蛋白这4种结构蛋白[5]。将PEDV的S蛋白分为S1、S2两个区域，S1集中了多个中和表位，其中，包含两个短的保守的B细胞中和表位，分别为744YSNIGVCK752和756SQYGQVKI771，它们主要决定病毒的抗原性[6-8]。所以，PED亚单位疫苗多基于S1蛋白来构建。

乙肝核心抗原 (hepatitis B core antigen, HBcAg)能够在酵母表达系统、大肠杆菌表达系统及杆状病毒-昆虫表达系统等多种表达系统中表达[9]。本研究选择的大肠杆菌表达系统和其他系统相比具有表达周期短、经济、易于操作和表达蛋白量高等优点[10]。当外源基因表位插入到HBcAg的主要免疫优势区(MIR)时，可在原核系统中进行表达，重组蛋白自发装配成病毒样颗粒(virus like particle, VLP)，且可增强外源基因表位的免疫原性[11-12]。VLP是具备病毒的一些抗原性，但不具备感染性的能够自我组装的类病毒粒子。

因此，本研究以HBcAg作为呈现PEDV S1 抗原表位的载体，构建了重组质粒，表达获得重组蛋白HBcAg-PEDV S1，通过透射电镜检测发现其可以形成VLP，这为今后研制PED的新型疫苗提供研究方法及理论依据。……