马金兰 王青 牛浩宇

1青海大学附属医院眼科（西宁810001）；2青海大学医学院眼科（西宁810001）

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的并发症之一，也是导致成年人失明的主要原因［1］。目前，DR 的发病机制尚未明确，且缺乏有效的治疗药物，一般认为持续的高血糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤是其发生的基础［2］。延龄草苷是延龄草的主要活性成分之一，具有抗炎、抗癌等功效［3-4］。研究［5］显示，延龄草苷可通过调控Sirtl/NFκB 信号通路提高过氧化氢诱导的PC12 细胞抗氧化能力，并降低细胞炎性因子表达，保护PC12 细胞损伤。但目前，延龄草苷是否影响高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤尚未明确。

微小RNA（miRNA）是一类小分子非编码RNA，在细胞氧化应激、炎症反应及凋亡中发挥重要作用［6-8］。研究［9］显示，过表达miR-1247-3p 可减少氧-糖剥夺/复氧处理的神经细胞凋亡，减轻缺血再灌注脑损伤。但目前，miR-1247-3p 对高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤的影响也还未知。本研究以人视网膜血管内皮细胞（HRVEC）为研究对象，主要观察了延龄草苷对高糖诱导的HRVEC 细胞氧化应激和凋亡的影响及其能否调控miR-1247-3p 表达发挥作用，以期为DR 的治疗提供新途径。

1 材料与方法

1.1 细胞和试剂人视网膜血管内皮细胞（HRVEC），上海雅吉生物科技有限公司；延龄草苷，纯度≥98%，上海钰博生物科技有限公司；胎牛血清（FBS），杭州四季青；DMEM 培养基，北京索莱宝；Trizol 试剂、逆转录试剂盒和PCR 试剂盒，大连宝生物；和LipofectamineTM2000 试剂盒，美国Invitrogen 公司；PCR 引物、miR-1247-3p 模拟物（mimcs）、模拟对照序列（miR-NC）、miR-1247-3p 抑制剂（anti-miR-1247-3p）、抑制剂阴性序列（antimiR-NC），上海生工，丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和活性氧（ROS）试剂盒，南京建成；……