赵清佳,汪 蓉,徐智儒,盛振海,梁 晨,张玉荣∗

(1.中国医药工业研究总院 创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海 200040;2.上海市公安局物证鉴定中心,上海市现场物证重点实验室,上海 200083)

芬太尼是强效的μ-阿片受体激动剂,其镇痛作用是吗啡的80倍,15 min起效,维持2 h,可产生欣快、呼吸抑制,大剂量产生肌肉僵直,用于各种原因引起的疼痛,但长期使用具有成瘾性。芬太尼的消除半衰期(t1/2)较短,以10μg·kg-1的剂量给药时,大鼠血液中的t1/2为3.72 h[1]。体内吸收后,尿液中芬太尼的原体或代谢物的浓度通常高于血液中的浓度,因此通过检测尿液中的原体或代谢物来判断吸食者的吸毒史,具有更高的参考价值,但目前对芬太尼代谢物检测时限的报道相对较少。

芬太尼主要在肝脏中被CYP450酶迅速代谢,去甲芬太尼为其主要的代谢物[2-3]。目前,生物检材中芬太尼的检测方法有均相免疫测定法[4-5]、气相色谱-质谱法[6-7]、液相色谱-串联质谱法[8-10]等。由于生物检材基质复杂,常常存在内源性杂质的干扰,为了延长色谱柱和仪器的使用寿命,提高目标物的检出限,在分析样品之前需要前处理。样品前处理常用的方法有液液萃取法(LLE)[10]、固相萃取法(SPE)[11]和蛋白质沉淀法(PP)[12]等。其中LLE和PP均存在耗时长、溶剂需求量大、污染环境等缺点,PP还会对色谱柱造成一定程度的损坏。而对于SPE研究显示[13],提供同样良好的检出限、准确度和精密度的情况下,离线SPE 需要手动活化、缓冲和淋洗等步骤,过程复杂。

本工作旨在开发一种在线固相萃取(on-line SPE)的前处理方法对尿液中的芬太尼和去甲芬太尼进行富集净化,建立一种前处理与检测全自动化的方法,同时将该方法用于研究芬太尼原体及其代谢物去甲芬太尼在大鼠体内的检测时限。……