陈小红，许贻斌，郑盛华，郑惠东，陈月忠，陈财珍

(1.福建省水产研究所，福建 厦门 361013； 2.福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室，福建 厦门 361013)

在近海养殖过程中，水动力条件的改变、大量饵料的投放以及强烈的生物沉降导致底质生境有机污染严重。在此过程中，含硫蛋白质降解和硫酸盐异化还原导致硫化物大量产生，对养殖区生态系统的结构和功能造成严重危害，成为制约海水养殖业健康发展的关键问题之一[1-2]。因此，研究控制海水养殖环境硫化物的技术显得尤为迫切，硫化物的生物控制具有环保、高效、持久的优点，是一种较有前景的控制技术[3]。

1 材料与方法

1.1 样品

从福建省湄洲湾近海养殖区采集沉积物样品，用于菌种分离。

1.2 培养基

选择性培养基：蒸馏水1 L，121℃灭菌15 min，加入过滤除菌的Na2S·5H2O(终浓度1 g/L)。

基础培养基[14]：MgSO4·7H2O 0.1 g、Na2S2O3·5H2O 5 g(由于Na2S·5H2O极易被氧化，影响实验准确，故选择Na2S2O3·5H2O替代)、K2HPO42 g、(NH4)2SO40.1 g、CaCl2·2H2O 0.1 g、FeSO4·7H2O 0.02 g、陈海水1 L，121℃灭菌15 min，用1 mol/L无菌HCl/NaOH调节pH至8.0。固体培养基在基础培养基基础上加15 g琼脂粉。

1.3 硫氧化菌的分离与纯化

取50 g沉积物样品于500 mL无菌三角瓶中，加入灭菌陈海水100 mL，在28℃、150 r/min进行摇瓶富集培养，每隔2天加1 mL选择性培养基到三角瓶中。20 d后将富集液按不同稀释梯度涂布于固体基础培养基上，28℃培养4 d。挑选优势菌落连续平板划线分离，纯化培养优势菌株，菌种保藏于4℃冰箱中备用。

1.4 菌株形态学与生理生化鉴定

将分离得到的菌株在固体基础培养基上培养，观察菌落形态。细菌革兰氏染色和生理生化特性实验参照北京陆桥生化试剂盒说明书进行。……