应用套式RT-PCR方法检测文山州疑似猪瘟的病例报告
2021-06-29吴孟洁赵敏朱玲云张绍卫唐清陈瑞雪
云南畜牧兽医 2021年3期
关键词:检测
吴孟洁,赵敏,朱玲云,张绍卫,唐清,陈瑞雪
(1.文山州动物疫病预防控制中心,云南 文山 663099;2.云南省兽医生物制品研制中心,云南 保山 678000)
猪瘟俗称“烂肠瘟”,是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒(Infectionwithclassicalswinefevervirus,简称CSFV)引起的一种急性、发热、接触性传染病,具有高度传染性和致死性。本病在自然条件下只感染猪,不同年龄、性别、品种的猪和野猪都易感,一年四季均可发生,是威胁养猪业的主要传染病之一[1]。疫苗免疫是猪瘟防控的重要策略之一。
猪瘟病毒属黄病毒科猪瘟病毒属,是一种RNA病毒。猪瘟因与高致病性猪蓝耳病等疾病在临床上表现得非常相似,使鉴别诊断难度增大。为了能快速、准确诊断猪瘟病毒,结合文山州基层兽医实验室的检测水平,运用国内较为成熟的PCR技术,建立了CSFV套式PCR检测方法,为快速诊断与预防猪瘟提供重要技术手段。
1 材料与方法
1.1 病毒和样品
1.1.1病毒
CSFV阳性样本、PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)阳性样本和PCV(猪圆环病毒)阳性样本均由云南省动物疫病预防控制中心惠赠,贮存于文山州动物疫病预防控制中心PCR实验室-79 ℃超低温冰箱。
1.1.2样品
发病猪病死后病理解剖时以出血性病变为主,全身淋巴结肿胀,扁桃体、脾脏、淋巴结有出血点。
采集发病猪和健康猪的扁桃体、脾脏和淋巴结3个部位,采集文山州8个县(市)大型规模养殖场疑似猪瘟病料共10份,贮存于文山州动物疫病预防控制中心PCR实验室-79 ℃独立冰箱。
1.2 主要试剂
AxyPrep体液病毒DNA/RNA小量试剂盒、95%无水乙醇、异丙醇、冰……
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