张业怀

（广西农业职业技术学院，广西 南宁 530007）

随着养殖实训场饲养动物的种类、数量及排泄物不断增多，随之带来的是环境污染、动物发病增多，抗生素长期使用导致病原菌耐药性产生严重。为了更好地防控动物疫病发生，减少环境污染，降低病原菌耐药风险，以广西农业职业技术学院养殖实训场为调研对象，对养殖实训场环境中细菌种类及主要病原菌污染及耐药情况进行调查研究，以期为养殖实训场的环境控制和临床用药提供科学指导。

1 材料与方法

1.1 试验菌株

选取广西农业职业技术学院养殖实训场前期调查研究分离鉴定获得的具有致病性作用的大肠杆菌（6 株）、沙门氏菌（5 株）、葡萄球菌（12 株）和不动杆菌（6株）共29株。

1.2 培养基及药敏纸片

普通琼脂培养基、肉汤培养基由本实验室提供；16 种抗生素药敏纸片（见表1、3），均购自杭州微生物试剂公司。

1.3 试验菌株的药敏性检测

采用药敏纸片琼脂扩散法对种4 主要病原菌进行药敏试验，即将各种病原菌接分别接种肉汤培养基，37℃培养24h，然后用灭菌生理盐水稀释，用细菌平板计数法测定并稀释成含菌量为1×106菌悬液，用灭菌棉签均匀涂布于普通琼脂平板上，每个平板均匀地贴5 张药敏纸片于培养基上，置37℃培养24～48h，分别用游标卡尺测量抑菌圈直径，每株菌做2个重复，判定标准参照美国临床实验室标准化协会（CLSI，2013）推荐的标准，分析4 种主要病原菌的耐药情况。耐药率是按同一种细菌的耐药株数除以总株数×100%来计算。……