赵佳男，彭景华，刘 平,2,3，胡义扬,2,3,4

1 上海中医药大学 肝病研究所，上海 201203； 2 上海市中医临床重点实验室，上海 201203；3 肝肾疾病病证教育部重点实验室，上海 201203； 4 上海中医药大学附属曙光医院 临床药理研究所，上海 201203

肝纤维化是指各种慢性肝病向肝硬化发展时肝脏损伤修复愈合反应的一种病理生理过程[1]，其中肝细胞凋亡在肝纤维化的形成过程中具有重要作用[2]。关于肝细胞凋亡与肝纤维化的联系，目前主要有2种机制[3]：(1)肝细胞凋亡后产生的凋亡小体被肝脏中的Kupffer细胞、肝星状细胞、肝窦周细胞吞噬，促进纤维化进展；(2)凋亡的肝细胞会释放核苷酸腺苷三磷酸、脂质溶血磷脂胆碱等促纤维化介质从而促进肝纤维化。

目前国内已有多种中成药应用于肝纤维化的治疗，如扶正化瘀胶囊、鳖甲软肝片等。这些方药中大多含有虫草菌丝或冬虫夏草。笔者在既往针对扶正化瘀胶囊有效组分的研究[4-6]中发现，虫草多糖具有显著的抗肝纤维化作用，其可通过抑制肝星状细胞活化和抑制TGFβ/Smads信号通路而发挥抗肝纤维化作用[7]，同时体内研究[8]也发现，虫草多糖有抗肝细胞凋亡的作用，因此，本文拟运用体外TNFα诱导的L02细胞凋亡模型，进一步探讨虫草多糖对肝细胞凋亡的影响及可能的机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞株 人正常肝细胞株L02，购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。

1.1.2 实验药物 虫草多糖(批号180316，纯度≥45%UV)购自上海融禾医药科技发展有限公司，称取0.028 g虫草多糖，加入1 ml细胞全培养基后进行冰水浴超声5 min混匀，配置为12.8 mg/ml的虫草多糖母液储存在超低温冰箱备用，后续根据所需实验药物浓度进行配置。……