顾 超，谭晓丹，向 葡，罗 映，杨俊卿，王 红

(1.重庆市生物化学与分子药理学重点实验室，2.重庆医科大学药理学教研室，重庆 400016；3.重庆市垫江县人民医院药剂科，重庆 408300)

脑卒中是世界上致死率、致残率最高的疾病之一，严重威胁人类的生命健康[1]。其中缺血性卒中占脑卒中的60%-80%，目前临床上针对缺血性脑卒中主要治疗方式是通过物理或药物溶栓，恢复缺血区血流供应，但血流复灌又会引起脑缺血/再灌注损伤[2]。脑缺血/再灌注损伤的发生发展十分复杂，其发病机制与氧化应激、神经炎症、神经元凋亡、细胞内钙离子超载等多种因素相关，且尚不完全明确。越来越多研究发现自噬参与脑缺血/再灌注损伤的发生发展，且在脑缺血/再灌注不同时期，发挥着截然不同的作用[3-5]。因此，深入探究脑缺血/再灌注中自噬的调控机制，寻找缺血性脑卒中的干预新靶点，为脑缺血/再灌注损伤的预防和治疗提供新的方向显得十分必要。

锌指/环指蛋白2(zinc and ring finger 2，ZNRF2)是一类特殊的膜相关E3泛素连接酶，在中枢和外周神经系统高表达，在维持突触建立发挥着重要的作用[6]；ZNRF2还参与氨基酸调节，维持细胞的生长[7]。最新研究表明，ZNRF2在肿瘤细胞的增殖、凋亡进程上发挥着重要作用，然而目前尚未见ZNRF2在神经系统疾病中的作用相关研究报道。因此，本实验拟采用氧糖剥夺/复糖复氧模型(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)模拟脑缺血/再灌注损伤体外模型，初步探讨ZNRF2对脑缺血/再灌注损伤的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 细胞PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞)，购于武汉普诺赛生命科技有限公司。……