黄鹏程，王敬亭，3，赵田田，，赵泽浩，，周长慧，，李若婉，朱春梅，郑 阳，常 艳，

（1.上海益诺思生物技术股份有限公司，上海 201203；2.中国医药工业研究总院，上海 201201；3.复旦大学药学院，上海 201203）

在真核细胞的生长过程中，DNA会因各种内在或外来因素如X射线、环境污染物和活性氧（reactive oxygen species，ROS）等发生损伤。在这些损伤中，DNA双链断裂是最为严重的损伤之一［1］。在形成DNA双链断裂数秒钟后，断裂处的组蛋白H2AX被磷酸化。磷酸化后的H2AX被称为γ-H2AX［1］。研究发现，γ-H2AX灶点数与DNA双链断裂数成对应关系。因此，对γ-H2AX灶点数的定量检测可反映DNA双链断裂损伤的程度［2］，是检测DNA双链断裂较为敏感的生物标志物之一［3］。目前γ-H2AX灶点检测已具备快速、准确和可高内涵分析的能力，但仍存在检测指标单一、假阳性率较高、需添加体外代谢活化系统和受细胞凋亡影响较大的局限［4］。

近年来，基于多色流式细胞术的多终点遗传毒性检测法，可将多个遗传毒性终点生物标志物的检测整合进γ-H2AX灶点检测，提高检测效率，降低检测假阳性率，还可以提供化合物作用机制等更多信息［6］，成为克服当前γ-H2AX灶点检测缺点的重要方法。

生物标志物P53蛋白、磷酸化组蛋白H3（p-H3）和活化多腺苷二磷酸核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase，PARP）可用于检测不同的遗传毒性终点。P53蛋白是一种调控细胞周期的转录因子，可以提供DNA损伤修复信息；p-H3可以作为非整倍体效应的生物标志物［5］；活化PARP是胱天蛋白酶的切割底物，可以标记胱天蛋白酶高表达的细胞。将这几种生物标志物整合到γ-H2AX灶点试验中，不但可以增加试验准确性，还可以排除胱天蛋白酶诱导的γ-H2AX灶点，降低试验假阳性率［6］。……