王 伟，赵四林，范伏元，金朝晖，李 妲，符 艳，孙 爽，肖雪飞，张慧卿，胡 立

（1.湖南中医药大学第一附属医院呼吸内科，2.湖南省人民医院呼吸内科，湖南 长沙410007）

慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD），简称慢阻肺，属于气道慢性炎症性疾病，近年来，其发病率不断增加，严重危害人类身体健康［1，2］。COPD发病机制尚未完全明确，但研究表明COPD与炎症细胞浸润、气道平滑肌增生肥厚有关［3，4］。气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）的增生肥大会 影 响COPD［5，6］。因 此 抑 制ASMCs增 殖 和 迁移是阻滞COPD进展的重要机制之一。研究表明miRNA与呼吸系统疾病的发生、发展相关，miRNA通过各种机制在COPD的发生发展中发挥着重要作用，可作为其诊断、治疗、预后等生物标记物［7-9］。研究报道miR-155在COPD患者外周血中表达水平升高，miR-155可能参与了COPD的发病过程，是导致肺损伤的重要物质［10］。哮喘气道平滑肌细胞中miR-155表达升高［11］。但miR-155对COPD患者气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响尚未清楚。本实验旨在研究miR-155对COPD患者气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2017年5月～2019年5月于本院进行肺部手术的8例COPD患者为观察组，选择3例无COPD病史的肺部良性肿瘤患者的正常肺组织作为对照组。所有患者知情并同意。

1.2 主要试剂

胎牛血清、DMEM培养基（美国Gibco）；胰蛋 白 酶（美 国Sigma）；Trizol、反 转 录 试 剂 盒、SYBR Premix ExTaqTM试剂盒（日本TaKaRa）；细胞周期检测试剂盒（美国Sciencell）；RIPA裂解液（北京百奥莱博科技有限公司）；Ki67、E-cadherin、N-cadherin抗体（北京博奥森生物技术有限公司）；GAPDH抗体及山羊抗兔IgG-HRP（北京索莱宝公司）；Transwell小室、Matrigel胶（美国Bio-Rad公司）；TNF-α、IL-6酶联免疫吸附试剂盒（上海恒斐生物科技有限公司）。……