(南华大学公共卫生学院，湖南省衡阳市 421001)

肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，2015年中国肝癌发病人数为37.0万人，发病率为26.92/10万，死亡人数32.6万，死亡率23.72/10万[1]。原发性肝癌发病隐匿，病程短，发展迅速，当前主要治疗手段有手术切除、放射治疗、药物治疗、肝移植等。但肝癌易复发、易转移，预后差，且对放化疗具有抵抗性，寻求治疗肝癌的药物具有重要意义。

原发性肝癌中最常见的肝癌组织类型是肝细胞癌[2]。本文探讨了NU7026抑制DNA-PKcs对肝癌细胞的增殖、迁移能力的影响，为治疗肝癌提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 材料

肝癌细胞(HepG2)由军事科学医学院周平坤研究员惠赠。HepG2细胞在含10%胎牛血清(杭州四季青公司)的DMEM培养基(Gibco)，37 ℃、5%CO2培养箱中培养。NU7026(LY293646，C17H15NO3)购于MCE公司，纯度为99.95%。细胞凋亡试剂盒、细胞周期试剂盒购于南京凯基公司。

1.2 CCK8实验

取处于指数生长期的 HepG2 细胞，用含 10%胎牛血清的培养液配成单个细胞悬液接种于 96 孔板中，加入适量的细胞悬液(约7 000～8 000个/孔)，待细胞贴壁后，分别用5、10、15、20 μmol/L NU7026进行处理，设3个复孔，继续培养 24、48、72 h，每孔加入10 μL CCK8 溶液，孵育1 h，用酶联免疫检测仪测定 450 nm 波长处的光密度值(OD)，计算细胞存活率。细胞存活率(%)=(实验组OD值-空白孔OD值)/(空白组OD值-空白孔OD值)×100%。

1.3 生长曲线实验

按2×104个/孔细胞接种于6孔细胞培养板，10 μmol/L NU7026处理细胞每组设3个复孔，每隔24 h计数1次，连续计数3天，以时间为横坐标，细胞数为纵坐标绘制生长曲线图。

1.4 克隆实验

将细胞接种于6 cm细胞培养皿，10 μmol/L NU7026处理细胞，10天后弃掉培养基，PBS洗2遍，加入固定液3 mL，固定30 min；再加入3 mL Giemsa染色30 min，最后用流水缓慢冲洗，晾干。……