(中南大学湘雅医学院附属株洲医院肿瘤科，湖南省株洲市412000)

肝癌是中国常见的恶性肿瘤之一，居中国癌症发病率的第五位[1]，手术是其主要治疗手段，但大部分病人发现时已为肿瘤中晚期，丧失了手术机会。即使进行了手术切除、原位肝移植和射频消融术，由于肝癌的高侵袭性和复发率，其预后仍不理想[2]。近年来研究表明，二甲双胍除降糖作用外，还具有抗肿瘤作用[3]。苯乙双胍同为双胍类衍生化合物，结构上不同于二甲双胍[4]，抗肿瘤活性也不同于二甲双胍。苯乙双胍无需任何转运蛋白即可通过细胞膜[5]。因此，苯乙双胍比二甲双胍有更好的组织生物利用度，其抗肿瘤作用是二甲双胍的50倍[6]，且苯乙双胍具有直接抗肿瘤作用[7]，也可增强化疗、放疗[8]或者靶向治疗[9]的疗效。目前关于苯乙双胍在肝癌中作用的报道少见，本文就苯乙双胍对肝癌细胞增殖、集落形成、侵袭能力的影响，以及其分子机制进行研究，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

苯乙双胍(中国阿拉丁试剂公司)；p-AMPK兔抗人单克隆抗体(美国CST公司)；p-mTOR兔抗人单克隆抗体(美国CST公司)；β-actin兔抗人单克隆抗体(美国CST公司)；LipofectamineTM2000脂质体(上海碧云天生物科技公司)；siRNA-AMPK(广州锐博生物科技有限公司)；倒置荧光显微镜-DMI3000B(德国Leica公司)；全自动化学发光图像分析系统-4600(上海天能科技有限公司)；多功能酶标仪-Synergy HTX(美国BioTeK公司)；人肝癌细胞株Hep-G2由中南大学湘雅医院赠予；人肝癌细胞株SMMC-7721由湖南师范大学医学院赠予。

1.2 细胞培养

SMMC-7721、Hep-G2细胞培养在含10%胎牛血清和1%双抗的完全培养基中，培养箱控制在37 ℃、5% CO2、100%湿度的环境下，3～4天传代1次。……