二烯丙基二硫对CD44+人胃癌AGS细胞生长的影响
2021-06-01
(南华大学衡阳医学院 1.肿瘤研究所,2.2018级临床医学系,湖南省衡阳市 421001)
胃癌是一种常见的全球性癌症[1],人们一直在孜孜不倦地探寻其发病机理。肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)假说认为,一群占比不高却具有干细胞特性的癌细胞驱动了肿瘤的发生发展,为癌症的深入阐明提供了新思路[2-6]。手术、放疗、化疗等传统的治疗策略以尽可能多清除癌细胞为目标,但肿瘤干细胞难以彻底杀死,导致癌症复发和转移,因此靶向消灭这类具有干细胞特性的胃癌细胞是胃癌治愈的切入点。
大蒜对肿瘤的有效杀灭作用主要依赖于其中所含的二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS),DADS的作用效果涉及对多种恶性生物学行为的抑制,是一种很有潜力的癌症治疗候选物[7-8]。本研究首先运用免疫磁珠分选技术从AGS胃癌细胞中分选富集CD44+细胞;接着经肿瘤球形成检测其干样特性、Transwell实验评估细胞迁移与侵袭效果;最后经DADS处理,通过MTT、软琼脂培养、流式仪等观察CD44+亚群的生长与周期分布情况,初步阐明DADS抑制人胃癌干样细胞生长的能力,以便进一步理解DADS对抗胃癌的治疗潜力。
1 材料和方法
1.1 材料
二烯丙基二硫(DADS)由Fluka公司生产,纯度80%。DMEM/F12培养基(1∶1)为赛默飞世生物化学制品(北京)有限公司出品。CD44包被磁珠购于Miltenyi Biotec公司。表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)均为eBioscience公司产品。FITC标记的鼠抗人CD44抗体和FITC标记的鼠抗IgG2b同型对照抗体均购于Biolegend公司。B27培养基添加剂购于Invitrogen公司。Matrigel基质胶由美国BD公司生产,Transwell小室属于Corning产品。
1.2 细胞培养和分选
AGS细胞株来源于上海市中科院细胞库。……
