李宝晶，吴 炎，王 磊*，叶文才*

1.云南中医药大学中药学院，云南 昆明 650500

2.暨南大学药学院，广东 广州 510632

蟾皮为蟾蜍科（Bufonidae）蟾蜍属BufoLaurenti动物中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizansCantor的干燥皮，具有清热解毒、利水消肿等功效，主治痈疽、肿毒、瘰疬、疳积腹胀[1]，临床常用于治疗恶性肿瘤、慢性乙型肝炎、面神经麻痹等。蟾皮中主要含有蟾蜍甾烯类、吲哚烷胺类生物碱、蟾蜍环酰胺等成分[2-4]，其中蟾蜍甾烯类化合物为其主要成分。蟾皮和蟾酥中的蟾蜍甾烯类化合物，如bufalin、cinobufagin、resibufagin等具有良好的抗肿瘤作用[5]。以蟾皮为原料制成的华蟾素注射液对肿瘤细胞有明显抑制作用，临床用于中晚期肿瘤的治疗[6-7]。为进一步明确蟾皮的抗肿瘤药效物质基础，本研究对蟾皮的化学成分进行研究，共分离并鉴定了14个蟾蜍甾烯类化合物，分别鉴定为3,23-dihydroxy-γ-lactone-24-norchola-14,20(22)-dien-21-oicacid（1）、3-表-酯蟾毒配基（3-epi-resibufogenin，2）、3-表-去乙酰华蟾蜍精（3-epi-desacetylcinobufagin，3）、3-表-蟾蜍灵（3-epi-bufalin，4）、3-氧-去乙酰华蟾蜍精（3-ketodesacetyl-cinobufagin，5）、3-氧-蟾蜍它灵（3-oxo-cinobufagin，6）、3-氧-伪沙蟾蜍精（3-oxoψ-bufarenogin，7）、3-oxo-Δ4(5)-resibufogenin（8）、3-oxo-Δ4(5)-cinobufotalin（9）、3-dehydroscillarenin（10）、3-氧-毛地黄毒苷配基（3-dehydrodigitoxigenin，11）、digirezigenin （12）、bufogargarizin A（13）、bufogargarizin B（14）。其中，化合物1为新天然产物，并首次报道其NMR数据。以上化合物均为首次从蟾皮中分离得到。此外，对分离得到的部分蟾蜍甾烯类化合物进行抗人肝癌HepG2细胞、人非小细胞肺癌A549细胞及人宫颈癌HeLa细胞增殖的活性测试，结果显示具有良好的细胞毒活性，其中3个化合物（6、9、10）具有显著的肿瘤细胞增殖抑制活性，半数抑制浓度（IC50）在0.11～1.67 μmol/L。

1 仪器与材料

JASCO P-1020旋光仪、JASCO V-550紫外/可见光谱仪、JASCO FI/IR-480 Plus Fourier Transform红外光谱仪（日本JASCO公司）；Bruker AV-300、Bruker AV-400核磁共振仪（德国Bruker公司）；Finnigan LCQ Advantage MAX质谱仪（美国Thermo公司）；Agilent 6210 LC/MSD TOF质谱仪（美国Agilent公司）；分析型及制备型高效液相色谱仪（美国Agilent公司）。……