邓梦琪 张艳芹 常翔宇 吴 迪 徐春玉 苗劲蔚

首都医科大学附属北京妇产医院妇瘤科，北京 100006

microRNA（miRNA）是一类特殊的非编码RNA，长约21～23 个核苷酸，通过与靶基因核糖核酸（mRNA）的3’-非编码区（3’-UTR）互补配对结合，在转录后水平修饰靶基因，从而调控基因表达[1-3]。近年来，miR-29 家族在多种肿瘤中起着重要的作用，miR-29c-3p 可以调控多种致癌过程，包括表观遗传学、蛋白质稳态、代谢、增殖、凋亡、转移、纤维化、血管生成和免疫调节[4-5]。目前对于同家族的Hsa-miR-29c-5p的研究处于初级阶段，仅在食管癌[6]、胆囊癌[7]等中探讨其作为抑癌基因并影响肿瘤发展进程的可能性。卵巢透明细胞癌（ovarian clear cell carcinoma，OCCC）属于卵巢上皮恶性肿瘤，其特性是起病隐匿、进展迅速、复发率高[8-11]。此外，透明细胞癌在早期表现为频繁转移至淋巴结和实质器官中，导致高度复发[12-14]。但在OCCC 中，Hsa-miR-29c-5p 相关报道较为罕见。基于此，本研究通过生物信息学方法分析Hsa-miR-29c-5p 在OCCC 细胞株中的表达情况及对细胞增殖、迁移活性的影响，旨在为OCCC 的治疗及预后提供新的切入点。

1 材料与方法

1.1 主要材料、试剂和设备

1.1.1 细胞株 人正常卵巢上皮细胞株（IOSE80）购自上海慧颖生物科技有限公司，人OCCC 细胞株（ES-2）购自武汉普诺赛公司。

1.1.2 主要实验试剂及材料RPMI-1 640 培养基（31800）、McCoy-s-5-A 培养基（M9420）、1XPBS 溶液（P1020）、RIPA 裂解液（R0010）、CCK-8 试剂盒（CA1210）均购自索莱宝生物科技有限公司；RNA 提取试剂盒（CW0627S）购自康为世纪；qRT-PCR 引物（MQP-0101）、qRTPCR 试剂盒（C10511-1）、Hsa-miR-29c-5p mimics（miR1190416032503）及miR-NC（miR1N0000001-1-5）均购自广州锐博有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养、传代及Hsa-miR-29c 转染将IOSE80置入RPMI-1 640 培养基（含10%胎牛血清）中，ES-2置入含10%胎牛血清的McCoy-s-5-A 培养基中，于37℃、5%CO2的环境下培养，每48～72 小时更换培养液，待细胞汇合度达到80%时进行细胞传代。……