高险亭 卢岭 梁耕田 陈应超 吴龙军

血管纹位于耳蜗中阶外侧壁,是维持耳蜗内环境稳定和内淋巴电位的器官。研究发现，内淋巴平衡破坏可造成外毛细胞的凋亡[1]。血-迷路屏障结构包括血管纹微血管内皮细胞、周细胞、基膜、复杂的紧密连接和粘合连接，它们类似于细胞间信号传导，能控制血管渗透性以及为听功能提供适宜的环境[2]。在基因遗传缺陷、各种炎症刺激、氧化应激、噪声损伤以及衰老细胞凋亡的病理条件下，血-迷路屏障细胞间相互作用导致其通透性增加，内外淋巴各种离子成分改变，耳蜗电位受影响，从而导致听力障碍[3]。本研究拟通过观察老化型C57BL/6J小鼠耳蜗外侧壁血管纹紧密连接蛋白(Claudin-5)、核转录因子(NF-κB)、细胞周期抑制蛋白(P21)的表达，探讨血管纹的改变对老年性聋发病相关机制的影响。

1 材料与方法

1.1实验动物与分组 SPF级健康C57BL/6J小鼠(江苏常州卡文斯实验动物有限公司)40只，分为两组，青年组(3月龄)20只，体重10～15 g；老年组(24月龄)20只，体重25～40 g;均排除中耳及内耳疾病。

1.2听性脑干反应(ABR)测试 两组小鼠均在隔声屏蔽室内用10%水合氯醛(330 mg/kg)腹腔注射麻醉，采用美国Nicolet Compass系统的ABR检测仪检测各组小鼠ABR阈值;记录电极刺入前颅顶正中皮下，参考电极刺入受试耳乳突皮下，接地电极刺入对侧耳后皮下，TDH-39型耳机给声，声源距耳廓1 cm，用交替短声(click)做刺激声，重复率10次/秒。滤波范围32～3 000 Hz，扫描时间10 ms，叠加512次;以引出可重复出现ABR波Ⅱ的最小刺激强度作为反应阈值。

1.3耳蜗取材及切片 两组小鼠……