高涵 吴琦 陈宏月 郭红艳 周涛 刘哲丞

(1齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室，黑龙江 齐齐哈尔 161006；2附属第一医院普通外科)

血红素加氧酶(HO)能催化血红素分解生成胆绿素，是血红素分解的限速酶。HO有3种亚型：HO-1、HO-2和HO-3，它们在基本结构、表达调节和组织分布中有很大差异。HO-1是Wise等〔1〕最先在体外实验中发现的一种能降解血红素的酶，命名为HO-1，HO-1可能与肿瘤的发生和发展有关。Llesuy等〔2〕研究发现这种酶可能具有细胞保护作用。

近年来研究发现，多种人类肿瘤有细胞周期蛋白(Cyclin)E基因的扩增和过度表达，可协同某些癌基因转化细胞和增强细胞的癌变倾向。Peng等〔3〕研究了CyclinD1和CyclinE异常表达及在肝癌中的作用，发现71例肝癌患者中有40例 CyclinE过度表达，且与低分化肝癌密切相关，提示CyclinE异常表达与肝癌生物学行为有关。p27是一个广谱细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制因子，它作为细胞周期的抑制剂，主要是通过与CDK或Cyclin-CDK复合物结合，抑制CDK的活性，从而对细胞周期进行调控。此外，p27能够促进细胞分化、抑制细胞增殖〔4〕。在以往的研究〔5,6〕中发现，肝癌组织中HO-1是高表达的。在前期实验中发现mtHO-1G143H转基因小鼠出现了多脏器肿瘤，此结果提示HO-1突变体的表达可能会影响细胞的增殖能力。本研究主要探讨HO-1对肝癌细胞CyclinE、p27的影响。

1 材料与方法

1.1材料 肝癌细胞系HepG2、质粒pcDNA3.1(+)和pCAAG由本实验室保存。胎牛血清、1640培养基购于美国GIBCO公司；限制性核酸内切酶Bam HⅠ/EcoRⅠ购于美国NEB公司；LipofectamineTM2000转染试剂盒购于美国Invitrogen公司；小鼠抗HO-1抗体购于德国默克公司；……