袁向科，江瑞

1河南省中医院周围血管科，郑州 450002；2河南省中医药大学第三附属医院老年病科，郑州 450002

血管内皮损伤及功能障碍是动脉硬化发生的始动因素。正常情况下，血管内皮结构完整、功能正常；而氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)的沉积会导致内皮细胞损伤、单核细胞浸润、血小板黏附聚集，并刺激血管平滑肌细胞向血管内膜迁移及增殖，巨噬细胞吞噬脂质而形成泡沫细胞，逐渐发展为动脉粥样硬化性斑块[1-2]。ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤模型广泛用于动脉粥样硬化发病机制的研究[3-4]。青蒿素(artemisinin，ART)是从菊科植物黄花蒿中提取的倍半萜内酯化合物。研究表明，ART可促进巨噬细胞的自噬，减轻炎症反应，进而抑制动脉粥样硬化斑块的形成[5-7]，还可延缓ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的进展[8]。但是，ART在内皮细胞损伤中的作用及其机制目前尚未明确。本研究通过构建ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤模型，探讨ART对血管内皮细胞损伤的保护作用及其潜在机制，旨在为动脉粥样硬化的防治提供新思路。

1 材料与方法

1.1 主要材料及试剂 人脐静脉内皮细胞E A.hy926购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心；ART、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)、瞬时感受器电位通道香草酸受体亚型Ⅳ(transient receptor potential vanilloid 4，TRPV4)阻断剂钌红(ruthenium red，RR)购自美国Sigma公司；DMEM高糖培养基、胎牛血清购自美国Gibco公司；ox-LDL、0.25%胰蛋白酶、青霉素-链霉素双抗(含100 U/ml青霉素+100 μg/ml链霉素)购自上海生工生物工程有限公司；噻唑蓝(MTT)检测试剂盒、BCA蛋白检测试剂盒、RIPA蛋白裂解液、Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)凋亡试剂盒、ECL化学发光试剂购自上海碧云天生物技术有限公司；……