张慧琴霍乃蕊冀霞段卓马林峰古少鹏

(山西农业大学动物医学学院,山西晋中 030801)

我国为畜牧大国[1],羊骨资源十分丰富,但其生物利用率极低,多用于动物饲料的添加[2]。羊骨营养丰富,蛋白含量约为15.4%,但90%以上的羊骨蛋白为生物利用度很低的胶原蛋白[2-3]。通过酶解制成羊骨胶原多肽(sheep bone collagen peptide,SBCP),不仅可提高生物利用度[4-5],而且赋予了其独特的生理功能,如抗氧化[6]、免疫调节[7]、改善松质骨[8]等。

巨噬细胞是一种多功能细胞[9],几乎存在于所有组织,构成机体免疫的第一道防线,是炎症反应的核心细胞[10]。巨噬细胞受到细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后,释放炎症因子如TNF-α、IL-6、IL-1 和 IFN-γ 等,产生 NO、活性氧等一系列炎症介质,激活 TLRs、NF-κB、MAPK 等信号通路[11],参与机体的炎症级联反应[12]。

前期研究表明,SBCP 可增强大鼠的免疫功能[7]。本研究旨在探究SBCP 对大鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬活性、代谢活力、炎症因子释放能力等免疫功能的影响;同时以LPS 刺激大鼠腹腔巨噬细胞,建立炎症免疫调节的细胞模型,探究SBCP 对炎症的免疫调节作用,为SBCP 开发为免疫调节剂提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

30 只 2 ～ 3 月龄 SPF 级 SD 大鼠,体重(203 ±20)g,雌雄兼用购自中国食品药品检定研究院(大兴)【SCXK(京)2017-0005】。饲养于山西农业大学动物实验室【SYXK(晋)2020-0003】,维持饲料购自山西医科大学动物实验中心。自由饮水,控制环境温度为(22 ± 2)℃,相对湿度40% ～ 60%,昼夜交替各12 h,其它环境条件符合GB14923-2001 的要求。本试验方案符合山西农业大学动物护理与使用委员会的要求(SXAU-EAW-2020SD0201)。

1.1.2 主要试剂与仪器

羊骨胶原肽购自内蒙古锡盟肽好,蛋白含量为98.78%,其中含90.78%分子量 ≤ 1000 Da 的肽,6.89% 羟 脯 氨 酸。……