黄艺滢白琳雷雪裴李珂雅李欣悦侯丽雅石桂英

(国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室,中国医学科学院医学实验动物研究所,北京协和医学院比较医学中心,北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心,北京 100021)

目前免疫检查点阻滞剂在肿瘤免疫治疗中受到很大关注, 靶向程序性细胞死亡蛋白 1(programmed cell death,PDCD1)和细胞毒T 淋巴细胞相关蛋白4 (cytotoxic T-lymphocyte associated protein 4,CTLA4)的治疗剂的成功为癌症治疗策略提供了更多的选择[1-2]。然而,尽管此疗法在一些患者中能够消除肿瘤并实现患者的长期生存,但并非对所有患者都有效果[3],许多患者对基于免疫检查点阻断的单一药物治疗有抗药性[4]。因此,具有不同作用机制或不同靶点的新型免疫调节药物亟待开发[5-6]。肿瘤坏死因子受体超家族成员 4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4,TNFRSF4)(也称为OX40 或 CD134)是 TNF 受体超家族的一员,在活化的T 细胞上高度表达,有一个已知配体TNFSF4(也称为OX40 L 或CD252),主要在活化的抗原呈递细胞上表达[7-8]。TNFRSF4 与配体结合并激活后,T 细胞中的下游细胞内信号通路激活,导致核因子 κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的转录激活[9]。目前,在早期癌症临床试验中测试了几种anti-TNFRSF4 激动性单克隆抗体,越来越多的临床前证据支持其临床发展[4]。人类和小鼠的TNFRSF4 只具有69.17%的同源性,为进一步研究TNFRSF4 相关药物,使用TNFRSF4 人源化小鼠是更好的选择。

采用CRISPR/Cas9 的方法将人源TNFRSF4 基因导入到小鼠的受精卵中,同时敲除小鼠内源TNFRSF4 基因的表达。TNFRSF4 人源化小鼠(TNFRSF4h/h)及TNFRSF4 敲除小鼠(TNFRSF4-/-)表型正常。通过建立基因结构和调节方式与人类相似的模型,改善TNFRSF4 在人与小鼠中种属差异导致的在临床测试与动物实验结果差异,从而使药物评价的结果更加客观。……