王船英 邾枝花 季婷婷 许玉芳

安徽医学高等专科学校，安徽 合肥 230601

茶叶，山茶科植物茶Camellia sinensis（Linn．）O．Katze的干燥嫩叶。嫩枝无毛。叶革质，长圆形或椭圆形，先端钝或尖锐，基部楔形，上面发亮，下面无毛或初时有柔毛，边缘有锯齿，叶柄无毛。茶叶是中国传统饮品，入口涩，回味甘。茶叶中含有儿茶素、茶多酚、茶多糖、咖啡因等多种有益成分，各种成分均有不同的保健功效。［1⁃3］咖啡因（C8H10N4O2），弱碱性化合物，作为茶叶中的一种重要成分，咖啡因具有兴奋中枢神经系统，促进新陈代谢、消除疲劳、增加心脏和胃肠道功能的作用。［4⁃6］近年来研究显示，咖啡因可以预防阿尔茨海默病、早产儿支气管肺炎，适当饮用还可以降低肥胖、糖尿病和肿瘤的发病风险。因此研究茶叶中咖啡因的含量，可以合理利用茶叶的保健功能［7］。?

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1仪器 高效液相色谱仪（Waters 1525⁃2489）；色谱柱（C18，5μm×4．6 mm×250 mm，大连依利特）；超声清洗仪（UP⁃2200H型）；万分之一电子天平（上海越平科学仪器有限公司）；AT⁃330柱温箱；电加热套；索氏提取装置；蒸馏装置；蒸发皿；熔点测定仪（北京科仪电光仪器，XT4B型）等。

1.1.2材料与试剂 茶叶（5批安徽不同产地市售茶叶，产地分别为黄山、霍山、桐城、岳西、六安）；咖啡因对照品（实验室自制）；氧化钙（分析纯）；氢氧化钠（分析纯）；95%乙醇（分析纯）；甲醇（色谱纯）；纯化水；0．45μm有机滤膜。

1.2 溶液的配制

1.2.1 对照品储备液的配制

1.2.1.1 对照品的提取精制 称取适量茶叶末，置于滤纸套筒中，250 ml圆底烧瓶中加入90 ml 95%乙醇，沸石5～6粒，利用索氏提取器装置连续回流1～2 h，回流液经蒸馏装置蒸馏浓缩，浓缩液转移至蒸发皿中，加入氧化钙3～4 g，沸水浴浓缩至黏稠，隔石棉网酒精灯加热，焙炒至干燥。……