杨 朋，钱 军，陈文飞，邓怀冬

(攀枝花学院附属医院药剂科，四川攀枝花 617000)

神经退行性疾病是当前威胁老年人生命健康的最主要危险因素之一，而神经炎症与包括阿尔茨海默病(alzheimer’s disease, AD)、帕金森疾病(parkinson’s disease, PD)和肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)在内的多种神经退行性疾病的发生发展密切相关[1-2]。神经炎症的发生主要与大脑内固有的免疫细胞小胶质细胞的过度活化有关，过度激活的小胶质细胞释放大量的促炎性因子，产生神经元毒性，导致神经元凋亡，从而损坏认知功能[3]。因此，控制脑内神经炎症将有助于神经退行性疾病的改善和治疗[4-5]。

盐酸二甲双胍(metformin, Met)是临床治疗2型糖尿病的一线用药，能显著改善胰岛素抵抗和降低血糖，还具有抗肿瘤、抗炎及心血管保护效应，并且能透过血脑屏障发挥神经保护效应[6-8]。然而，Met能否抑制神经炎症及其抗神经炎症的潜在机制尚不明确。因此，本研究用Aβ1-42诱导BV-2细胞建立神经炎症模型，分别从分子、基因及蛋白水平探究Met对炎性因子表达的影响及分子机制，以期为Met治疗神经炎症性疾病提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料Met(Sigma，纯度99%，货号PHR1084)，Aβ1-42、MTT(Sigma)，DMEM培养基、胎牛血清(Gibco)，TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18 ELISA试剂盒(武汉华美生物工程有限公司)，总RNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司)，逆转录试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)，PCR试剂盒(QIAGEN公司)，TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18 RT-PCR引物(Invitrogen)，NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB、p-IκB、IκB抗体、RIPA裂解液(Cell Signaling Technology)，β-actin抗体、HRP标记山羊抗鼠抗体、HRP标记山羊抗兔抗体(上海碧云天生物技术有限公司)，蛋白浓度检测试剂盒(Bio-Rad)，高敏型ECL化学发光检测试剂盒(南京诺唯赞生物科技有限公司)。……