张 偎 综述，徐克前 审校

1.中南大学湘雅医学院医学检验系，湖南长沙 410013；2.中南大学湘雅三医院检验科，湖南长沙 410013

高效分离和准确鉴定循环肿瘤细胞(CTC)对肿瘤的早期诊断具有重要意义。目前，CTC的分离方法按原理可以分为物理分离和免疫分离两大类，且各自分为许多亚类。分离后的细胞通常需要进一步鉴定分析，这是因为单纯依靠分离方法捕获的细胞纯度较低，混杂了许多白细胞。通过对细胞表面分子标记、内部核酸等进行定性、定量分析，不仅能够得到高纯度的CTC，还可以根据细胞分型的结果鉴别不同来源的肿瘤，为肿瘤的转移、用药和监测提供可靠的帮助。现对CTC的分离和鉴定方法进行综述。

1 CTC的分离

1.1物理分离方法 物理分离方法也称为“无标签分离”，目前主要有密度梯度离心法、基于细胞大小分离法，以及与电学、声学、光学分离相结合的微流控技术。

1.1.1密度梯度离心法 CTC核质比较高，根据沉降系数的差异可将CTC分离开。目前开发出的平台主要有Ficoll-Hypaque、Percoll和OncoQuick。Ficoll-Hypaque分离范围较窄，多用于分离外周血单个核细胞，而Percoll利用不同浓度的离心剂，大大拓宽了分离范围。带有多孔筛的OncoQuick有效减少了白细胞污染[1]。密度梯度离心法操作简单、成本低，但分离纯度低，一般作为预富集方法。

1.1.2基于细胞大小分离法 CTC与血细胞相比体积通常较大，根据此差异可分离细胞。ISET、ScreenCell、Parylene-C、FMSA、CellSieve、3D钯滤光片、镍微孔筛等平台均为微孔过滤装置，平台间的差异主要体现在滤膜材料、孔径大小上，各类微孔滤膜的比较见表1。……