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沙丁胺醇人工抗原的制备及ic-ELISA方法的建立

2021-05-12崔芳微郭东光李文明朱艳平孙国鹏王选年

动物医学进展 2021年5期
关键词:标准检测方法

崔芳微,郭东光,李文明,朱艳平,李 鹏,孙国鹏,岳 锋,王选年*

(1.新乡学院生物技术研究中心,河南新乡 453000;2.郑州大学,河南郑州 450000)

沙丁胺醇(salbutamol,SAL)别名为舒喘宁,化学名被称为4-羟基-5-羟甲基苯基-α(叔丁胺)甲基苯乙醇胺[1],是人工合成的肾上腺素药物,具有β2-受体激动剂的作用,为白色结晶性粉末(图1)。SAL与“瘦肉精”克仑特罗促生长效果相同[2],其性质及检测方法的研究相对较少,检测手段也较滞后,因而逐步取代盐酸克仑特罗成为不法分子谋取暴利的新手段,造成的不良影响和危害也日趋严重,也越来越引起人们的重视。

图1 SAL化学结构式

目前,检测沙丁胺醇的方法有高效液相色谱法(HPLC)[3-5]、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、液相色谱-质谱联用法(LC-MS)[6]和酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)[7]等。虽然GC-MS、HPLC和LC-MS方法准确可靠,但样品前处理繁琐,对仪器设备以及操作过程的要求较高,不适于生产、基层单位及现场检测,而SAL的快速检测对SAL监督起着至关重要的作用[8-9]。因此,针对当前SAL使用现状,建立快速、灵敏、方便的检测技术,对食品中SAL残留物的检测及防控具有重要的现实意义。免疫分析技术是一种常用的快速检测技术,特别是近年来在食品分析中得到越来越广泛的运用,其中ELISA法具有操作简便、快速、特异性和灵敏度高,费用低等优点,能够用于SAL检测的定性及定量测定,是当前应用最为广泛的兽药残留的检测方法[10]。

因此,本研究通过制备沙丁胺醇完全抗原,获得针对SAL的多克隆抗体,以此为基础通过对反应条件的优化建立了检测SAL的间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测方法,为进一步开发快速检测SAL试剂盒和胶体金免疫层析试纸条奠定基础。……

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